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2 材料与方法
2. 1 供试样品
大白菜、黄豆芽、青菜、菠菜皆购自淮安市菜市场
2. 2 仪器
小型粉碎机、分光光度计、恒温水浴锅、电子天平、比色管（25ml*8）、烧杯（若干）、漏斗、容量瓶、量筒
2. 3 试剂
氯化铵缓冲液、 硫酸锌溶液(0.42mol/L) 、 氢氧化钠溶液(20g/L) 、对氨基苯磺酸溶液
N－1－萘基乙二胺溶液(1g/L)、 显色剂、 亚硝酸钠标准溶液、 亚硝酸钠标准使用液
2.4.1 样品处理
（1）新鲜样品 称取约10.00g（青菜，大白菜，菠菜，黄豆芽）经绞碎混匀样品，置于研钵中，加入35mL水和6mL氢氧化钠溶液(20g/L)，混匀，用氢氧化钠溶液(20g/L)调样品pH＝8，定量转移至200mL容量瓶中再加入5mL硫酸锌溶液，混匀，如不产生白色沉淀，再补加2～5mL氢氧化钠，混匀。置60℃水浴中加热10min，取出后冷却至室温，加水至刻度，混匀。放置0.5h，用滤纸进行过滤，弃去初滤液20mL，收集滤液备用。
（2）隔夜样品 将上述滤液留取一半放在冰箱中，待 24小时之后，进行亚硝酸盐的含量的测定。
2.4.2 测定
（1）亚硝酸盐标准曲线的制备：吸取0，0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mL亚硝酸钠标准使用液(相当于0，2.5，5，10，15，20，25μg亚硝酸钠)，分别置于25mL带塞比色管中。于标准管中分别加入4.5mL氯化铵缓冲液，加2.5mL60%乙酸后立即加入5.0mL显色剂，加水至刻度，混匀，在暗处静置25min，用2cm比色杯，以零管调节零点，于波长550nm处测吸光度，绘制标准曲线。
（2）样品测定：吸取10.0mL上述滤液于25mL带塞比色管中，于标准管中分别加入4.5mL氯化铵缓冲液，加2.5mL60%乙酸后立即加入5.0mL显色剂，加水至刻度，混匀，在暗处静置25min，用2cm比色杯，以零管调节零点，于波长538nm处测吸光度，查标准曲线得到相应的亚硝酸盐含量，计算出实际样品中亚硝酸的含量。同时做试剂空白。
2.4.3波长的选择来.自/751论|文-网www.751com.cn/
吸取不同体积的亚硝酸钠标准使用液分别置于50ml带塞比色管中，分别加入2.00ml对氨基苯磺酸溶液，密塞混匀，放置3min后，再依次加入1.00ml盐酸萘乙二胺溶液，密
塞混匀，放置10min后定容。用1cm比色皿以蒸馏水为参比，测定吸光度。可知亚硝酸盐的最大吸收波长为538nm