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    纤维素酶的产生菌种自然界中可以降解和利用纤维素的微生物种类很多,许多细菌和放线菌可分解纤维素,而且产生的纤维素酶具有高度专一性,但是它们生长速度慢,需要厌氧的生长条件[5],这些都限制了其应用。到目前为止,对微生物产纤维素酶的研究大多属于真菌。主要有木霉属(Trichoderma)、曲霉属(Aspergillus)、青霉属(Penicillium)、根霉属(Rhizopus)和漆斑霉属(Myrothecium)。真菌产的纤维素酶多数为胞外酶,便于分离和提取,且纤维素酶各组分较为齐全,所以一般用于工业化生产的纤维素酶大多来自于真菌[6],目前,最具有潜在工业应用价值的是木霉,特别是里氏木霉(T. reesei)[7]。因为它具有很强的降解结晶纤维素的能力,能大量分泌纤维素酶,酶稳定性较好。这种酶又是胞外酶,易分离纯化,适用于工业酶制剂的制备和酶作用机理研究[8]。56788

    纤维素酶

    纤维素酶能够降解纤维素成葡萄糖的一类多组分的复合酶系[9]。它是指能水解纤维素β-1,4-葡萄糖苷键,使纤维素降解为葡萄糖的一组酶的总称。它不是单一组分的酶,而是起协同作用的多组分酶系。一个完整的纤维素酶系通常由作用方式不同而能相互协同催化水解纤维素的三类酶组成[10],即:①内切葡聚糖酶(简称EG),随机水解β-1, 4-糖苷键将长链纤维素分子截短,产生大量带非还原性末端的短链葡聚糖。②外切葡聚糖酶论文网,称纤维二糖水解酶(Cellobiohydrolase简称CBH),作用于纤维素分子非还原性末端,水解β-1, 4-糖苷键,每次降解产生一个纤维二糖分子。③β-葡萄糖苷酶(简称β-G;又称纤维二糖酶,简称CB)将纤维二糖水解为单个的葡萄糖分子。

    纤维素酶可广泛应用于能源、化工、食品、轻工、饲料等领域[11],纤维素酶属于诱导酶类,纤维素酶的合成受到培养基中诱导物的种类、分布和浓度影响很大[12]。

    里氏木霉产纤维素酶的诱导剂

    诱导物是指某种化学因子或物理因子,它能够直接或间接地影响某种DNA结合蛋白,从而启动基因的转录表达[13]。天然纤维素的酶解产物主要是纤维二糖、纤维寡糖和葡萄糖,已发现纤维二糖能够诱导多种真菌产纤维素酶[14]。王晓芳等将葡萄糖加入以纤维二糖为诱导源的一株木霉的培养物中后,发现葡萄糖能促进而并非抑制纤维素酶的合成[15]。原因是,加入葡萄糖减弱了纤维二糖在胞外的水解,纤维二糖就能够被菌体吸收进入细胞,进而诱导纤维素酶的合成[16]。

    Mandels等发现,虽然分析纯葡萄糖不能诱导Trichoderma reesei合成纤维素酶,但是试剂级葡萄糖却可以诱导纤维素酶的合成[14]。原因是试剂级葡萄糖中含有杂质,该杂质对T. reesei有极高的诱导活性,经分离纯化后发现具有诱导活性的杂质是槐糖。槐糖(2-O-β-D-吠喃葡萄糖-D-葡萄糖)是一种二糖,其促进纤维素酶的合成速度比纤维素快。T. reesei在纤维素培养基上生长40-60h后,纤维素酶开始在培养基中积累。以槐糖为诱导物,在培养6h后就能检测到纤维素酶活,产酶间隔时间大大缩短[17]。槐糖对T. reesei的诱导活性是纤维二糖的2500倍,是微品,纤维素等其它诱导物的几十到几千倍[18],一直以来都被认为是纤维素酶合成最有效的诱导物。

    另外一种二糖-乳糖也被发现能有效促进真菌纤维素酶的合成[19],只是其对T. reesei产纤维素酶的诱导能力没有槐糖强.但是乳糖能够有效促进丝状真菌Acremonium cellulolyticus高效合成纤维素酶[20]。

    此外,艾云灿等在实验中发现龙胆二糖能诱导纤维素酶的合成[21],Sahoo等发现山梨糖在没有其它碳源的情况下也能促进休眠菌丝合成纤维素酶[22];Karaffa等发现在低生长速率时,D-半乳糖能有效诱导T. reesei产生纤维素酶[23]。L-山梨糖也能诱导T. reesei纤维素酶基因的转录[24]。添加适量的麸皮能够提高里氏木霉Rut C-30单位发酵液内的纤维素酶量,促进纤维素酶的生产,麸皮价格低廉、供应充足,将更适于纤维素酶的工业化生产[25]。

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