质地比较松软,延性较弱,但是展性较强的重金属铅,易在空气中氧化失去光泽并且变暗。近些年来,随着我国经济的不断发展,铅污染逐渐成为威胁人们健康的首要因素。据可靠调查研究发现,当人体内血铅浓度低于30 mg/100 ml时,就不会出现头晕、肌肉关节炎、失眠、血虚、腹痛、月经不调等慢性铅中毒症状。
由Glu、Cys和Gly构成的GSH在机体各器官内普遍存在,为文护细胞生物效力发挥重要作用。GSH能够参与三羧酸循环及糖代谢,因为它既能作为甘油醛磷酸脱氢酶(GAPDH)的辅基又能作为乙二醛酶(GLO)及丙糖脱氢酶的辅酶。由转-CH3及转丙氨基反应,我们可知:GSH能够保护肝脏的正常合成,促进肝脏解毒,帮助使激素失活,更能够通过增进胆酸代谢来提高消化道摄取脂肪及脂溶性文生素的能力。谷胱甘肽还原酶(GR)是黄素酶中的一种,氧化型谷胱甘肽能够通过由辅酶NADPH供氢的FAD还原成还原型谷胱甘肽,细胞液中GR的含量显著增加,从而达到抵抗自由基氧化产生的对机体的损伤的作用。在全身各组织分布普遍的GST是一组与肝脏解毒作用相关的酶,能促进GR与一系列亲电子化合物(包含各类致癌物)结合,形成无毒的结合物并将其从体内扫除到体外,其自己也可与亲电子化合物结合进而促成机体解毒。GST遭到抑制后既能够影响需经其代谢的外来物又可以影响机体的解毒作用。
具有抗氧化、糖原贮积和合成蛋白质等作用的肝脏,在体内的主要功能是代谢。肝脏是体内脏中最大的器官,可产生多种酶,在身体协调中起着举足轻重的作用。
本实验研究原花青素对铅暴露下的小鼠肝脏组织损伤。着重研究原花青素对非酶型抗氧化成分谷胱甘肽(GSH)含量以及抗氧化酶谷胱甘肽还原酶(GR)和谷胱甘肽-S转移酶(GST)的活力的影响。揭示了原花青素对铅暴露下鼠组织氧化应激损伤的机制。为原花青素作为防治铅暴露下的职业病和污染灾害造成的损伤防治或者食品添加剂提供一些有用的资料。
1.材料与方法
1.1供试材料
1.1.1实验动物
昆明小鼠(徐州医学院动物养殖中心购买)。
1.1.2实验试剂
原花青素(南京建成生物工程研究所),生理盐水,无水乙醇,醋酸铅。
试剂均为分析纯试剂。
1.1.2.1谷胱甘肽(GSH)测定试剂盒的组成与配制:
表1. 谷胱甘肽测定试剂盒的组成与配制
Table 1. Determination of Glutathione Composition and Preparation Kit
1.1.2.2 GR测定试剂盒的组成与配制:
1.1.2.3谷胱甘肽-S转移酶测定试剂盒的组成与配制:
1.1.3实验设备
TGL-16B高速枱式离心机(上海安亭科学仪器厂)、Sartorius电子天平、UV-7504单光束紫外-可见分光光度计(上海分析仪器总厂)、DK-S24电热恒温水浴锅(上海恒科仪器有限公司)、Haier BCD-259BSW电冰箱(青岛海尔股份有限公司)、研磨器、移液枪。
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