2 材料与方法
2.1材料
2.1.1植物材料
采样时间为2015年11月;采样地点为福州国家森林公园,园内的土壤母岩主要是结晶花岗岩与凝质岩[9],公园的地理位置坐标为东经:119.28, 北纬:26.08;福州温度适中,年平均气温大约在19度左右,降雨量较为充足,年降水量约莫1000毫米以上,光照充足 [10]。
2.1.2供试菌
大肠杆菌(Escherichia coli)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin Staphyloccocus aureus,MRSA),上述菌种保藏在江苏师范大学江苏省药用食物生物技术重点实验室。
2.1.3试剂与培养基
试剂:去离子水 工业酒精 次氯酸钠 无菌水 液体白蜡
培养基及配方:
1. LB培养基(Luria-Bertani):培养细菌的培养基为溶菌肉汤培养基。胰蛋白胨10g/L 、酵母提取物5g/L 、 氯化钠10g/L 、琼脂粉15g/L
2. PDA培养基(Potato Dextrose Agar):培养真菌的培养基为马铃薯葡萄糖琼脂培养基。称取200g马铃薯,洗净去皮切碎,加水1000ml煮沸半个小时,用纱布过滤,再加20g葡萄糖和20g琼脂,充分溶解后趁热纱布过滤,分装试管,每试管约5ml,121℃灭菌20分钟后取出试管摆斜面,冷却后贮存备用。来!自~751论-文|网www.751com.cn
3. 真菌发酵培养基:同PDA,不含琼脂。
2.1.4仪器
超净工作台,霉菌培养箱BMJ-250,恒温培养箱DNP-9052,真空泵SHZ-D(III)离心冷冻浓缩仪LNG-T98,恒温摇床TCYQ,高压灭菌锅LDZX-50KBS,磁力搅拌器85-2型,电子天平BT-124S,冰箱,照相机 ,旋转蒸发仪,微孔过滤器,通风橱,酶标仪。