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    然而,城市垃圾填埋场渗滤液,厌氧消化污泥浓缩液,禽畜养殖废水,氮肥生产和半导体制造出水中存在某些重金属如Cu(Ⅱ),Zn(Ⅱ),Cd(Ⅱ),Pb(Ⅱ),Ni(Ⅱ)[6]。在这些重金属之中,低浓度的Cu是微生物中许多酶和辅酶必要的微量元素和组分。但是高浓度的Cu会抑制微生物代谢过程,如硝化,反硝化和葡萄糖发酵过程[7]。

    已有报道Cu(Ⅱ)对厌氧氨氧化工艺产生抑制作用[6,8-11]。笔者之前的研究发现连续流反应器中anammox菌可以承受5 mgL-1 Cu(Ⅱ)的冲击,当浓度达到8 mgL-1 时,anammox菌受到严重抑制。此外,批次实验中5-10 mgL-1 Cu(Ⅱ)对anammox颗粒产生严重的累积抑制[11]。然而,实际工业废水中Cu浓度非常高,例如半导体制造废水中Cu浓度常达到5-100 mgL-1 [7]。城市污水中,住宅废水将工业废水稀释,所以其Cu浓度较低,但在实际安装工程中突发情况(如进水浓度波动)是不可避免的,这都可能导致Cu浓度过高。据我所知,目前关于受Cu抑制厌anammox反应器的恢复研究中,采用的策略有污泥驯化、菌种流加等调控策略[11],均较笼统,无针对性。

    本文的研究目的是⑴评估超负荷Cu(Ⅱ)对anammox系统的影响;⑵在连续流条件下追踪Cu(Ⅱ)在系统中的行为和归趋;⑶探索受Cu抑制的anammox反应器的恢复策略。

    2 材料与方法

    2.1 无机模拟废水

    无机模拟废水包含基质,碳酸氢盐和微量元素,由水泵引入到anammox反应器中。等摩尔的氨和亚硝酸盐分别以(NH4)2SO4和NaNO2的形式提供,浓度按需配制。

    2.2 anammox反应器与操作策略

    实验采用4个UASB反应器(R0为母反应器,有效容积为2 L,用于添加实验,R1,R2,R3有效容积为0.5 L,用于连续流实验),反应器用黑布遮盖以避免光抑制,置于35±1℃的恒温室中。连续流实验的水力停留时间(HRT)为1.2 h。R0接种污泥取自实验室规模的高负荷UASB反应器。接种污泥具有良好的沉降性能(82.3±22.5 m h-1)和颗粒粒径(2.86±1.42 mm),具有良好生物量滞留性能。污泥颗粒中的anammox菌以Candidatus Kuenenia stuttgartiensis为主。母反应器R0投加Cu(Ⅱ)后共运行60 d,期间每隔15天浓度提高一次,依次为5,8,10,12 mgL-1,相应的Cu容积负荷(CLR)分别为0.10,0.16,0.20,0.24 g L-1 d-1。在Cu投加前,R0在脱氮负荷(NRR)约为10 kgN m-3 d-1的稳定状态下运行了20天以上。第60天,从母反应器R0中取出500 mL anammox颗粒进行EDTA清洗或超声-EDTA清洗预处理,分别引入到R2和R3中。R1接种污泥则只经过蒸馏水清洗。R1,R2,R3最初的挥发性悬浮固体(VSS)浓度约为15.0 g L-1。

    2.3anammox颗粒中Cu形态分析

    污泥中的Cu形态采用BCR法分级提取,原子吸收分光光度法测定。BCR连续萃取法步骤如下:(1)酸提取态:准确称取0.5 g土样,加入20 mL的0.11 mol/L醋酸,在室温下(22±0.5℃)振荡16 h;在3000 rpm的离心力下离心分离20 min,过滤,上清液用于测定重金属酸提取态的浓度。(2)可还原态:向上一级提取后的剩余物加入20 ml的0.5 mol/L盐酸羟胺,用硝酸调节pH至1.5,在室温下(22±0.5℃)振荡16 h,在3000 rpm的离心力下离心分离20 min,过滤,上清液用于测定重金属可还原态的浓度。(3)可氧化态:向上一级提取后的剩余物中加入5ml的过氧化氢(pH 2-3),在室温下静置1 h,在加热到85±2℃静置1 h,然后再加入5 ml的过氧化氢温度维持在85±2℃静置1 h,最后加入25 ml的1 mol/L乙酸铵(pH=2),振荡16 h;在3000 rpm的离心力下离心分离20 min,过滤,上清液用于测定重金属可氧化态的浓度。(4)残渣态含量由土壤中总Cu量减去以上三种形态的重金属含量计算得出。

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