2.4 EPS提取和三维荧光光谱
采用热提取的方法提取胞外聚合物(EPS)[14]:将总体积25 mL的污泥样本在3000 rpm下离心30 min使固液分离。上层清液为可溶性EPS(S-EPS)。剩下的颗粒污泥经清洗后用0.85%的NaCl溶液重悬至25 mL。然后将混合液进行100℃热处理1 h,在3000 rpm下离心30 min。得到的上清液为固着性EPS(B-EPS)。混合液经0.45 μm生物膜过滤后最终得到EPS。估算出可溶性EPS和固着性EPS中糖类和蛋白质含量。利用蒽酮法测定可溶性糖, Lowry法测定蛋白质[15]。三维荧光光谱使用荧光分光光度计测定(日立F-4600荧光分光光度计)。三维荧光光谱中的发射波长和激发波长为200-600 nm,增量为5 nm。激发和发射缝隙维持在10 nm,扫描速率为12000 nm/min。为了检测低能级的光源,光电倍增管工作电压设置为500 V。以双蒸馏水光谱为空白对照,采用Origin 8.0软件处理EEM数据。在每个EEM光谱中用等高线表示荧光强度。