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3.1.4 铜绿微囊藻的培养 13
3.2 实验方案论证 13
3.3实验内容 14
3.3.1 土霉素储备液的配置 14
3.3.2铜绿微囊藻生长曲线及抑制率 14
3.3.3藻液的培养 14
3.3.4 微囊藻藻毒素的测定方法 15
4. 实验结果与讨论 17
4.1 生长曲线与抑制率 17
4.2 EC50的计算 20
4.3 铜绿微囊藻细胞内外藻毒素含量检测 21
5. 实验结论 25
致谢 27
参考文献 28
1. 引言（绪论）
1.1 抗生素的污染现状
1.1.1概况
抗生素是一种以低微浓度状态即能影响其它生物机能的化学物质。它的发现与应用，在人类身体健康及动植物病虫害防治方面起了关键的作用。但是，随着抗生素的大量生产及应用，伴随而来的污染问题也变得越来越严重。但由于这种现象及危害性是间接的隐蔽的，并不像其它环境污染那样直观，因此，大多数人并未认识到这种影响的潜在后果。
英国每日电讯报报道，世界卫生组织警告，由于抗生素已经对一些病菌失效，普通感染、小擦伤、常规手术可能会变得具有致命性，抗生素危机比20世纪80年代的艾滋病疫情更严重、紧迫。据统计，我国人均使用抗生素剂量，高达美国人均量的十多倍。
相比于用于医疗方面的抗生素控制现状有所好转，抗生素在畜禽生产中的使用就更加令人担忧，常用高剂量抗生素量治疗各种疾病，用低剂量抗生素量促进畜禽生长和增产，因此抗生素在畜禽生产中的有着巨大的使用量。目前几乎遍布在全球所有地区都存在采用抗生素来实现增加产量、提高经济效益的现象。然而，研究表明，抗生素药物只有15%可被生物体被吸收利用，剩余的大约85%的由于未被代谢而被直接排放至环境中。
例如，绵羊口服的土霉素中21%通过尿液排出体外，而对于幼牛17～75%的氯四环素未经代谢就以母体化合物的形态被排出体外。到2010年，全国畜禽粪便的排放量将达45亿吨。如此大量的畜禽粪便排放，是构成我国抗生素面源污染的主要原因之一［1］。
1.1.2土霉素（四环类抗生素）的污染现状
土霉素(Oxytetracycline，OTC)是于20世纪40年代发现的四环素族成员，别名5-羟基四环素，地霉素，地灵霉素，氧四环素等，分子式为C2H24N209，相对分子质量为460.44，是一种广谱类抗菌药物，被广泛用于治疗乳房炎，同时士霉素又是一种生长促进剂，常常在畜牧业中被作为饲料添加剂使用。药物分子中包括一个线性融合的四环素核是土霉素的抗菌活性的最重要特征。土霉素通过阻止氨酰tRAN 与细菌核糖体结合来抑制细菌蛋白质合成。目前在许多国家中土霉素已限量生产并趋于淘汰，其原因主要是近年来发现土霉素耐药菌株普遍增多。但由于一些新型抗生素虽然疗效好，但成本高，价格贵，而这土霉素类产品生产成本低，价格便宜，服用方便，在农村广大地区耐药菌株相对较少；其次与人们用药习惯也有关系。所以土霉素在国内仍有很大市场。
在养殖业中土霉素是最被广泛使用的广谱抗菌药之一，进入畜禽体后，土霉素原形和其体内代谢产物会随粪尿等排泄物一起进入环境，给环境带来潜在的生态风险。其在进入人或动物体内后，由于氧化、还原、水解以及共轭接合作用，这些药物的理化性质和生态毒性伴随着其形态的改变而改变，在畜禽业的生产中四环素类抗生素有30%～90%以母体化合物形式随粪便排出，甚至可高达95%。在某些特定的环境条件下，四环素类抗生素还会以代谢物的形式排出生物体外，代谢物也具有活性，并且可以进一步转化为母体化合物。某些四环素类抗生素的代谢物甚至比母体化合物对环境产生的危害更大。抗生素在畜禽业中使用量越大，畜禽粪便中残留的抗生素量就越大，对土壤环境的造成污染也因畜禽粪便土地利用残留的抗生素后变得越来越严重。