每个处理取2个样品。放入粉碎机打碎后用纱布过滤出橙汁,打开折光仪盖板,用纱布或卷纸将镜面擦拭干净,然后再棱镜玻璃面上滴加2-3滴橙汁,盖上盖板后水平观察,读取实业中明暗交界线上的刻度,即为果蔬汁中可溶性固形物含量(%),实验重复一次。
2.3数据统计分析与作图
本课题所有实验数据均使用SAS数学统计软件(SAS Institute, version 8.0,Cary,NC)中的ANOVA方法(邓肯氏差异分析方法,p<0.05)
3分析与讨论
3.1蒸馏型桔子油和冷榨型桔子油的体外(in vitro)抑菌效果
在PDA培养基中分别加入100、500、1000、1500、2000、2500μl/L的蒸馏型、冷榨型桔子精油后,接种P.italicum,放入28℃恒温培养箱培养4天和7天后统计菌落直径,结果分别如表2和表3,不同的浓度的蒸馏型、冷榨型桔子精油对P.italicum均具有一定的抑菌效果,浓度越高,菌落直径越小。并且冷榨型精油比蒸馏型精油具有更好的抑制效果。
表2 第4天蒸馏型桔子精油和冷榨型桔子精油对P.italicum的直接接触抑制效果
Table 1 Effects of two types of orange oil on P.italicum (in vitro) at the 4th day
Concentration/
μl/L
Diameter
/cm
蒸馏型桔子精油 冷榨型桔子精油0
2.25±0.21a
100 2.05±0.64ab 2.13±0.12ab
500 1.90±0.17ab 1.93±0.21ab
1000 1.90±0.10ab 1.80±0.28ab
1500 1.77±0.06ab 1.85±0.07ab
2000 1.80±0.26ab 1.70±0.14b
2500 1.57±0.21b 1.20±0.26c
蒸馏型桔子精油抑制效果最好的处理是2500μl/L,培养后的菌落直径与对照相比减少了0.68cm;冷榨型桔子精油抑制效果最好的处理为2500μl/L,培养后的菌落直径与对照相比减少了1.05cm,当精油浓度降低到100μl/L时,抑菌效果减小,但与对照相比,仍有显著的抑菌效果(p<0.05)。
表3 第7天蒸馏型桔子精油和冷榨型桔子精油对P.italicum的直接接触抑制效果
Table 2 Effects of two types of orange oil on P.italicum (in vitro) at the 7th day
Concentration/
μl/L
Diameter
/cm
蒸馏型桔子精油 冷榨型桔子精油
0 9.00±0.00a
100 9.00±0.00a 9.00±0.00a
500 8.67±0.29a 8.27±0.25ab
1000 8.03±0.15b 7.40±0.46b
1500 6.20±0.17c 5.30±0.36c
2000 5.73±0.25d 4.60±0.53c
2500
4.37±0.12e 3.43±0.31d
表2和表3中的字母表示不同处理之间的差异性(p<0.05)
蒸馏型桔子精油抑制效果最好的处理是2000μl/L和2500μl/L,培养后的菌落直径与对照相比分别减少了3.27cm和4.63cm;冷榨型桔子精油抑制效果最好的处理为2000μl/L 和2500μl/L,培养后的菌落直径与对照相比分别减少了4.40cm和5.57cm,当精油浓度降低到1000μl/L时,抑菌效果减小,但与对照相比,仍有显著的抑菌效果(p<0.05)。
P.italicum是橙子贮藏期间青霉病的致病菌,根据表2和表3的结果,后续试验选择橙子作为研究对象,并选择1000μl/L的精油浓度进行果实上的试验。
3.2 植物精油、壳聚糖以及壳聚糖植物精油的结合处理对意大利青霉的影响
将品相完好大小均一的橙子洗净、晾干,在橙子表面打孔并接种P.italicum,室温下培养5天后统计其菌落直径并计算抑制率。结果如图1所示。图(a)为各个处理对P.italicum平均病斑直径的影响,从图中我们可以看到不同处理与对照相比均有显著的降低橙子&&病发病率的效果。壳聚糖与精油结合处理形成的涂膜比单一处理效果好,其中1%壳聚糖+1000μl/L冷榨型桔子精油的平均直径为0.76cm,抑制效果最为明显。并且,不论是单一处理还是结合处理中,含有冷榨型桔子精油的处理比含有蒸馏型桔子精油的效果要好。图(b)显示了各个处理对P.italicum发病率的影响,发病率规律与病斑直径规律相似,其中效果最好的为1%壳聚糖+1000μl/L冷榨型桔子精油和1%壳聚糖+1000μl/L蒸馏型桔子精油,发病率均在40%左右。
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