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摘要通过硫沉、透析、离子交换从大豆中提取出大豆乙酰酯酶，然后利用酶抑制技术成功从农药厂排污口的污泥中筛选出降解毒死蜱的菌种，经革兰氏染色表明，该菌种为革兰氏阴性菌，并且能够在毒死蜱浓度为1g/L的培养液中生长。将湿菌体与含有碳酸钙的海藻酸钠溶液混合，然后滴入氯化钙溶液中固定化，实验结果表明，固定化的菌能够降解毒死蜱，固定化小球直径约4毫米，且在锥形瓶中振荡培养8天仍能保持球形状的完好。使用分光光度计测定毒死蜱降解菌的降解效率时，实验结果与预期的相反，由于时间关系，未能找到实验失败的原因。25829
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关键词 毒死蜱降解菌株 酶抑制技术 固定化 表征
毕业设计说明书（毕业论文）外文摘要
Title Screening of chlorpyrifos degrading bacteria
Abstract
By sulfur Shen, dialysis, ion exchange extracted acetylesterase out from soy soybean , then use enzyme inhibition technology successfully screened from pesticide plant outfall sludge degrading bacteria chlorpyrifos, the Gram stain showed that the bacteria species of Gram-negative bacteria, and is capable of broth 1g / L of survival in a concentration of chlorpyrifos. The wet cells were mixed with a solution containing sodium alginate, calcium carbonate, calcium chloride solution and then dropped for Immobilization, results showed that the immobilized bacteria capable of degrading chlorpyrifos, immobilized beads diameter of about 4mm, and with shaking the bottle will remain intact ball shape for 8 days. When measuring the chlorpyrifos degrading bacteria degradation efficiency by using a spectrophotometer, results contrary to expectation, because of the time, could not find the cause of the failure of the experiment.
Keywords Chlorpyrifos degrading strain Enzyme inhibition technology immobilized Characterization
目 次
1 绪论 2
1.1 引言 2
1.2 毒死蜱的简介与应用 2
1.3 大豆乙酰酯酶简介 3
1.4 有机磷农药残留检测方法 3
1.5 有机磷农药的降解方法 4
1.5.1 物理法降解农药 4
1.5.2 化学方法 4
1.5.3 微生物降解法的研究进展 5
1.6 细菌固定化 5
1.7 本论文的研究目的和意义 6
2 实验材料与方法 7
2.1.1 实验药品 7
2.1.2 实验仪器 8
2.2 实验方法 8
2.2.1 富集培养 8
2.2.2 菌种的筛选 9
2.2.3 大豆酯酶的提取 10
2.2.4酶检测体系的确定 11
2.2.5 菌种的鉴定 11
2.2.6 菌种保存 12
2.2.7 菌种的革兰氏染色 12
2.2.8 菌种的固定化 13
2.3 实验结果与讨论 14
2.3.1 目的菌种的鉴定结果与特性 14
2.3.2 实验的注意事项 18
2.3.3 实验的改进 19
2.3.4 尚待解决的问题 20
结 论 21
致 谢 22
参考文献 23
1 绪论
1.1 引言
中国是世界上使用农药最早的国家之一，在提高农作物产量的同时，农药也对环境造成了极大的危害[1]。而且大部分农药都属于高毒化合物，误食会造成人畜的急、慢性中毒，因此人们对农药的残留问题开始高度重视，并对农药残留的检测技术提出了更高的要求。传统的农药残留检测技术有气相色谱法、液相色谱法、薄层色谱法、毛细管气相色谱法等，虽然这些方法技术比较成熟，但是它们的预处理时间、检测时间都较长，而且检测费用高、检测设备昂贵，检测方法较难被普通工作人员掌握。随着食品安全问题日益突出，研发可靠、快速、灵敏、实用的残留农药检测技术无疑是控制农药残留、保证消费者安全的基础。