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为改善传统育苗的不足之处,本实验以甜叶菊转录组数据为基础,基于EST-SSR分子标记为手段,通过分析甜叶菊EST-SSR与甜叶菊RA含量之间的关系,开发与甜叶菊RA密切相关的EST-SSR标记,实现在苗期便可初步推断出甜叶菊RA含量的情况,提高高RA甜叶菊的育种速度。
1 材料与方法
1.1 实验材料、试剂及仪器
1.1.1 实验材料
本实验所用材料均从位于南京浦口的江浦农场甜叶菊育苗基地搜集,经罗庆云老师鉴定确定为菊科植物甜叶菊(S. rebaudiana )。
1.1.2 实验试剂
DNA提取试剂盒、PCR反应用MIX、TBE缓冲液、TAE缓冲液、Arc、Bis、AP、AgNO3、NaOH、NaHCO3、冰醋酸
1.1.3 实验仪器
高压蒸汽灭菌锅、分析天平、
电子
天平、电热鼓风干燥箱、高速冷冻离心机、梯度热循环PCR仪、水平电泳槽、垂直电泳槽、电泳仪、凝胶成像仪、双光束分光光度计、移液枪、超低温冰箱。
1.2 实验方法
1.2.1 甜叶菊采集
根据甜叶菊叶片内RA与STV含量情况,将甜叶菊内RA含量由高到低将甜叶菊分为3个大的类群,即:高RA、STV与RA含量相近、高STV,在南京江浦农场采集由罗庆云老师栽培的甜叶菊
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