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    2.6紫甘薯花青素对高脂饮食的小鼠肝脏应激激活蛋白激酶水平的影响:    13
    3 .讨论    14
    4 .致谢    16
    参考文献:    16
    引言:
    近年来,随着人们生活水平的不断提高,由过度饮食引起的非酒精性脂肪肝病发病率显著上升,如何治疗和预防此类疾病已成为当今的热点。过度饮食可导致肝脏内脂肪堆积,诱发肝脏内质网应激,导致肝脏损伤,最终诱发糖尿病和各种代谢类疾病[1]。研究表明,非酒精性脂肪肝病的病变基础是脂肪酸代谢紊乱[2],而内质网是脂肪酸代谢的第一场所,脂肪酸的大量代谢产生的活性氧会与不饱和脂肪酸反应形成过氧化脂肪酸,扰乱细胞中的内稳态平衡,诱发肝脏内质网应激[3]。肝脏内质网应激,是肝脏细胞的一种保护性应答[4], 但是当这种应答超出细胞自身承受限度时,最终会导致细胞凋亡[5]。动物实验证明,肝脏内质网应激与肝脏细胞的凋亡有直接的关系[6]。
    虽然现代医学界对肝脏损伤已有深入的研究,也探究了肝脏损伤的机理,但是肝脏内质网应激导致肝脏损伤的机制尚未阐明,对此类肝脏疾病虽有多种治疗手段,但都有很大的不足。西药治疗虽然有一定的疗效,但是毒副作用较大[7],激素治疗方法局限性较大[8]。因此,从自然界中寻找能有效治疗非酒精性脂肪肝病且无毒副作用的天然产物已成为当今医学研究的热点之一。花青素作为一种具有广泛生物活性的天然产物[9],吸引了大量学者对其进行研究。
    紫甘薯花青素,是一类天然的黄酮类色素,具有较强的抗氧化活性和与清除自由基的能力[10]。相比同类花青素,紫甘薯花青素的资源更加丰富,在食品加工方面和医疗保健方面有广阔的发展前景[11]。据报道,花青素能有效抑制肥胖[12]。大量科学研究证实,紫甘薯花青素不仅能清除生物体内代谢产生的自由基,还能激活生物体内的各种非酒精性脂肪肝病发病率,缓解肝功能障碍,从而达到保护肝脏的效果[13]。同时紫甘薯花青素也能促进脂质的代谢,加快脂质的分解,有效地防止由于脂肪堆积而引起的肝脏氧化损伤[14]。黄正明等[15]的研究表明,紫甘薯花青素能够增强生物血清中抗氧化酶的活力,有效地改善肝功能。日本学者的研究发现,紫甘薯花青素能够有效地抑制餐后高血糖[16]。
    紫甘薯花青素作为二十一世纪的研究热点,科研工作者们已对其进行了大量的研究,证实了紫甘薯花青素在治疗癌症、心脑血管疾病、抗衰老等方面具有卓越功效[11], 在治疗肝脏损伤方面也有优异的效果,但是对紫甘薯花青素抑制肝脏损伤,尤其是抑制内质网应激的研究并不多。
    本课题建立高脂饮食的诱导的小鼠肝脏损伤模型,探讨紫甘薯花青素抑制肝脏内质网应激的相关作用机制,旨在探究紫甘薯花青素保护肝脏的作用机制,加强对紫甘薯花青素在医疗保健方面的研究,为紫甘薯花青素治疗非酒精性脂肪肝病提供理论依据。
    1 .材料与方法
    1.1实验材料:
    1.1.1 药品与试剂
    紫甘薯花青素(青岛鹏远天然色素研究所,中国)。谷丙转氨酶(ALT)试剂盒(南京建成生物工程研究所)。HE染色试剂盒(南京建成生物工程研究所)。BCA蛋白浓度测定试剂盒 (Pierce Biotechnology. USA)。p-PERK (Thr 981) 抗体(兔抗),t-PERK抗体(兔抗);p-eIF2α抗体(兔抗),t-eIF2α抗体(兔抗);p-JNK1抗体(兔抗),t-JNK1抗体(兔抗);p-IKKβ (Ser181)抗体(兔抗),t-IKKβ抗体(兔抗);二抗为HRP偶联的抗兔二抗。(Cell Signaling Technology, Inc. Boston. USA)。TMB显色剂  (Amresco. USA)。
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