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摘要本文研究了从土壤中筛选菌株，并确认了菌株中酶的类型。首先将从土壤中得到的菌株，用 LB 培养基培养筛选出抗扁桃酸的菌株。再将抗扁桃酸菌株进行摇瓶培养，筛选出以L-苯甘氨酸为唯一碳源的菌株。将筛选得到的菌株超声破碎后，离心，上清酶液中的酶通过分光光度法确定是否有苯甘氨酸脱氢酶。鉴于苯甘氨酸转化为苯乙酮酸，催化该反应的酶可能是脱氢酶，也可能是转氨酶。若其中的酶是转氨酶，苯甘氨酸与酮酸反应，生成苯乙酮酸与新氨基酸，用鸭肝谷氨酸脱氢酶验证新氨基酸的存在，借此来验证该酶是转氨酶。研究结果表明，除 L17 外，其他筛选出来的菌株中没有苯甘氨酸脱氢酶。27237
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毕业论文关键词 L-氨基酸氧化酶 苯甘氨酸脱氢酶 转氨酶
Title Screening of L-α-amino acid oxidase strains Abstract
This paper studies the strains isolated from the soil and identified the type
of enzyme.First,the strains obtained from the soil,with LB medium screen
anti-mandelic strains.The anti-mandelic strains shake flasks and screen
strains using L-phenylglycine as sole carbon source.After the strains were
broken with ultrasound and centrifugaled.The enzymes in the supernatant use
spectrophotometry to determine whether Phenylglycine dehydrogenase
exists.Given Phenylglycine is converted to acid phenethl,the catalyst which
catalyzes the reaction may be transaminase.If the enzyme is
transaminase,phenylglycine and acid are converted to the new amino acid and
phenethl.Then,we use duck liver glutamate dehydrogenase to verify the presence
of the new amino acid,which verify whether the enzyme is a transaminase.The
results show that,in addition to L17,the other screened strains don’t contain
phenylglycine dehydrogenase.
Keywords L-amino acid oxidase Phenylglycine dehydrogenase Transaminase
目 录
1 引言.1
1.1 氧化还原酶的简介.1
1.2 有关于L-氨基酸氧化酶的国内外研究进展1
1.3 L-氨基酸氧化酶的生物学功能.2
1.3.1 蛇毒L-氨基酸氧化酶诱导细胞凋亡的过程3
1.3.2 L-氨基酸氧化酶的抑菌作用的机理.3
1.3.3 对血小板的作用及机理.4
1.3.4 抗艾滋病病毒及机理4
1.3.5 其他生物学功能.5
1.4 研究课题的提出与内容.5
1.4.1 研究课题的提出.5
1.4.2 研究内容.6
2 实验.7
2.1 实验材料.7
2.1.1 实验仪器.7
2.1.2 实验试剂.7
2.2 筛选抗扁桃酸的菌株.7
2.2.1 实验原理.7
2.2.2 实验步骤.7
2.2.3 实验结果.8
2.3 筛选以 L-苯甘氨酸为唯一碳源的菌株.8
2.3.1 实验原理.8
2.3.2 实验步骤.8
2.3.3 实验结果.8
2.4 证实苯甘氨酸脱氢酶是否存在.8
2.4.1 实验方法.8
2.4.2 实验过程.9
2.5 证实转氨酶是否存在.15
2.5.1 实验讲解.15
2.5.2 提取纯化鸭肝谷氨酸脱氢酶的步骤.15
2.5.3 实验操作.16
结论.21
致谢.22
参考文献.23
1 引言
1.1 氧化还原酶的简介
新陈代谢是生命活动的基础，是生命活动最重要的特征。酶能够催化构成新陈代谢
的物质变化和能量变化。细胞所产生的酶是受很多因素调节控制的，具有催化能力的生
物催化剂。根据酶所催化的反应性质的不同，可以将酶分为氧化还原酶，转移酶，水解
酶，裂和酶，异构酶和合成酶这751大类。氧化还原酶分为氧化酶与脱氢酶两种。氢供体
在大部分的氧化还原反应充当被氧化的底物，而氢受体在大部分的氧化还原反应充当被
还原的底物。当受体是氧气时，氧化酶能够催化该反应的发生，除氧化酶外，其他基本
为脱氢酶。NAD+或 NADP+是大多数脱氢酶的天然电子受体。