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            ProB3下游引物(ProB3-R):5' TTTTTTTTCTTCCTTGGCGTG 3'
            ProA4上游短引物(ProA4_short_F):5' TGTGTGTGTGGCTGAAACCG 3'
            ProB3上游短引物(ProB3_short_F):5' ACTGTTTCATCTGCCCCCC 3'
            pGWB3下游短引物(GUS_R):5' TGCCGTAATGAGTGACCGC 3'
    1.2.2.2  扩增启动子片段
        利用这两对引物从野生型日本晴基因组中进行 PCR 扩增 ProA4和ProB3 片段,PCR条件如下(反应体系50μl):
            5×Buffer        10μl
            dNTP            4μl
            F引物            1μl
            R引物            1μl
            Template        1μl
            GXL酶            1μl
            DdH2O            32μl
            总计            50μl
        PCR仪参数设置:预变性 98℃ 1min;98℃ 10sec,60℃ 15sec,68℃ 1min/kb,35个循环;后延伸 68℃ 7min。
        之后对PCR扩增产物进行跑胶验证,其中ProA4长度为2126 bp,ProB3长度为2254 bp。对验证成功的片段进行切胶回收。
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