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1.4 形态指标的测定
用直尺测量黄瓜幼苗的株高[2],用游标卡尺测量茎粗[2],直接数出各组平均每株叶片数目,通过测量叶片的长宽结合经验公式求得总叶面积[4],用电子天平测定整株黄瓜幼苗的总湿重。
1.5 生理指标的测定
1.5.1 黄瓜幼苗叶绿素含量的测定[9-11]
1.5.1.1 试剂
(1)纯丙酮 (2)80%丙酮
(3)碳酸钙 (4)石英砂
1.5.1.2 操作步骤
分别取A、B、C、D、E组的黄瓜幼苗的新鲜叶片,避开中脉,剪碎叶片,称取0.5g鲜样,放入研钵中,加入纯丙酮5mL,少许CaCO3和石英砂,研磨成匀浆,再加入80%丙酮5mL,继续研磨至组织变白,在暗处静止3~5min后,用一层干滤纸过滤到25mL容量瓶中,用滴管吸取80%丙酮洗净研钵和滤纸的周围色素并过滤到容量瓶中,待滤纸和残渣全变白后,用80%丙酮定容至刻度。
然后分别取上述各组的色素提取液1mL,各加80%丙酮4mL稀释后转入比色皿中,以80%丙酮为空白,分别测定OD652值。
1.5.1.3 结果计算
叶绿素总量(mg/g鲜重)=OD652×V×1000/(m×34.5)
式中: OD652 —表示在所指定波长下,叶绿素提取液的光密度值;V—叶绿素丙酮提取液的最终体积,单位为mL;m—所用黄瓜叶片鲜重,单位为g。
1.5.2 黄瓜幼苗根系活力的测定[9-11]
1.5.2.1 试剂
(1)40ug/mL的α-萘胺溶液:精确称取0.10g分析纯α-萘胺,先用2mL95%酒精溶解,加约50mL蒸馏水移入100mL容量瓶中,然后稀释至刻度,保存于棕色瓶中,置于低温暗处保存。用前稀释25倍(40mL稀释至1000mL)即为40ug/mL溶液。
(2)1%对氨基苯磺酸溶液:称1g对氨基苯磺酸溶于100mL 30%乙酸(醋酸)中。
(3)100ug/mL亚硝酸钠溶液:称0.10g亚硝酸钠溶于1000mL蒸馏水中。
(4)0.067mol/L pH7.0磷酸缓冲液:称7.1184g Na2HPO4.2H2O(或14.4004g Na2HPO4.12H2O )与3.6292g KH2PO4定容到1000mL容量瓶中。
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