② 将溶液含氮量作为从变量,消光值作为自变量,得出回归方程式。
③ 样品处理:取3mL瘤胃培养液在3500-4000转/分下,离心10分钟,量取2ml上清液(若含氮量较高,可取1ml上清液再加1ml蒸馏水),置于15ml试管内,再加入8ml 0.2M盐酸至10ml摇匀(稀释倍数为5或10)。
比色操作:精确量取各溶液0.4 ml ,置于10ml试管内,各管内再依次加入D液和E液2ml,混匀,静置10分钟之后,比色。波长700nm,0.5cm的比色皿,空白对照是不含氮的0号管液。将各消光值记录下来。将测得的消光值代入回归公式,计算的结果乘以样品稀释的倍数,结果便是原样中氨氮的含量。
1.4高效产氨菌的分离
利用滚管技术在严格灭菌厌氧条件下对细菌进行分离。取富集培养24h的发酵液,梯度稀释至10-15,选择10-11至10-15作为接种梯度,接种0.5ml稀释液到融化的固体培养基中,混匀,迅速于冰槽中滚动至培养基凝固,然后置于恒温培养箱中培养,待菌落形成后,进行挑菌