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1.4 方法
1.4.1 饲养条件
在农贸市场购买的泥鳅在实验室水缸中先暂养2d,所用的水为至少曝气24 h以上的自来水。室温为27~32℃,暂养期间和实验期间都没有给泥鳅喂食。在做实验前选择身体健康、反应迅速灵敏、大小基本一致的泥鳅用于实验。
1.4.2 染毒
采用静水法[14]对泥鳅染毒。在查阅文献的基础上,分别设置了2.0 mg/L、1.75 mg/L、1.50 mg/L、1.25 mg/L、1.00 mg/L,将泥鳅随机分为5个染毒组,每组2条。其结果是不到48h泥鳅全部死亡。第二次设置的浓度梯度是0.4 mg/L、0.35 mg/L、0.30 mg/L、0.25 mg/L、0.20 mg/L,将泥鳅随机分为5个染毒组,每组2条。在经历了96h后,0.20 mg/L浓度的汞溶液中泥鳅全部都活,0.25 mg/L、0.30 mg/L浓度的汞溶液中,一半的泥鳅成活。由此可以得出重金属汞离子对泥鳅的96h半致死浓度在0.20~0.30 mg/L之间。第三次设置的751个浓度梯度为0.30 mg/L、0.28 mg/L、0.26 mg/L、0.24 mg/L、0.22 mg/L、0.20 mg/L.将泥鳅随机分为6组,每组2条泥鳅。在96h后得出的是0.26 mg/L处泥鳅成活一半,0.24 mg/L浓度的泥鳅全活,则重金属汞离子对泥鳅的96h半致死浓度为0.26 mg/L。,知道了96h 重金属汞离子对泥鳅的半致死浓度,那么根据公式可以求出重金属汞离子对泥鳅的安全浓度是=1/10*LD50 =0.026 mg/L。在预实验的基础上,把实验分为三组0.26 mg/L、0.026 mg/L、空白组。将泥鳅随机分为3组。0.26 mg/L浓度组的放24条泥鳅分两个水缸,0.026 mg/L浓度组的放12条泥鳅,空白组的放12条泥鳅,96h后,每组从水缸中还活着的泥鳅中随机取8条泥鳅进行解剖。取泥鳅的肝胰脏,鳃,卵巢,脑放入冰箱中备用。
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