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    3.3 细菌的紫外诱变    19
            3.4标准曲线的绘制    22
    3.5 多糖含量的测定    23
    3.6 发酵条件的优化    23
    4  结论及展望    25
    致谢    27
    参考文献    29
    1  前言
    1.1  硫酸软骨素概述
    1.1.1 硫酸软骨素
    硫酸软骨素(chondroitin sulfate;硫酸软骨素)是连接在蛋白质上形成蛋白聚糖的一类糖胺聚糖,存在于软骨、腱、韧带和主动脉等组织的基质中。基本结构为葡萄糖醛酸和N-乙酰半乳糖胺(又称N-乙酰氨基半乳糖),双糖单位之间由β~1,4苷键连接。由于硫酸基团在半乳糖上的位置和多少的不同而分为4-硫酸软骨素 (硫酸基团在半乳糖的第4位c上 ),6-硫酸软骨素(硫酸基团在半乳糖的第6位c上)。其基本结构单元见图1-1,实际上多数硫酸软骨素都是4-硫酸和6-硫酸二糖单位的共聚体。
    硫酸软骨素结构式
    图1.1-1 硫酸软骨素结构式
    硫酸软骨素的物理性质为:分子量在5000~30000之间, 一般含有20~60个双糖单位,是一种高分子化合物。 成品为白色或微黄色粉末;略带咸,无臭,易溶于水,在乙醇、丙酮或冰醋酸中不溶;水溶液具粘稠性,加热不会凝结。
    硫酸软骨素广泛存在于一些动物如鱼、牛、羊、鸡等软骨组织中,其中4-硫酸软骨素在哺乳动物的软骨中含量很高,也是机体其它组织的天然组成成分,而6-硫酸软骨素则主要存在于鱼类的软骨中。
    1.1.2 硫酸软骨素的药理及保健作用
    (1) 硫酸软骨素的药理作用:
    因硫酸软骨素具有降血脂、抗凝血、 抗肿瘤、促进冠状动脉循环和防止血管硬化等生物活性,在抗凝血及抗血栓、调节血脂及抗动脉粥样硬化、抗炎及保护骨关节、调节细胞黏附作用、抗过敏及免疫调节、阻碍血管生成、抗氧化、抗纤文化和调节神经生长中发挥重要作用[1]。在抗肿瘤作用、抗粘连作用、促进细胞增生方面也有很大成效 。人类可使用硫酸软骨素治疗骨关节炎、牛皮癣、动脉粥样硬化、炎症性肠病和自身免疫性疾病。因此硫酸软骨素在临床上有多种用途 。
    (2)保健及其他用途:
    硫酸软骨素为结缔组织中天然存在的成分,能够结合水分子用于润滑和支撑关节,使关节活动自如。 在国外上市的硫酸软骨素或以硫酸软骨素为主要原料的制剂很多,作为膳食补充剂用于保护关节。
     硫酸软骨素与顺铂合用减少肾毒性,硫酸软骨素也可延长消毒抗菌时间以及净化病毒。硫酸软骨素也可用于生物膜的构建、人工骨或软骨的构建、活性脚手架的构建、人工真皮的构建。
         硫酸软骨素 作为生物药物,取材安全,方便,且生物活性高,副作用小,具有很大的应用市场。
    1.1.3  国内外研究现状概述
    1.2  枯草芽孢杆菌概述
    1.2.1 枯草芽孢杆菌
    枯草芽胞杆菌,是芽胞杆菌属的一种。单个细胞0.7~0.8×2~3微米,着色均匀。无荚膜,周生鞭毛,能运动。革兰氏阳性菌,芽孢0.6~0.9×1.0~1.5微米,椭圆到柱状,位于菌体中央或稍偏,芽孢形成后菌体不膨大。菌落表面粗糙不透明,污白色或微黄色,在液体培养基中生长时,常形成皱醭。需氧菌。生长温度:最高温度45-55℃;最低温度 5-20℃。 可利用蛋白质、多种糖及淀粉,分解色氨酸形成吲哚。在遗传学研究中应用广泛,对此菌的嘌呤核苷酸的合成途径与其调节机制研究较清楚。广泛分布在土壤及腐败的有机物中,易在枯草浸汁中繁殖,故名[5]。
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