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将筛选出的3份菌株取单个菌落各一环分别接种到100mL液体 LB培养基中,放入35℃、120r/min的培养摇床中培养。15h后发现LB培养液已经浑浊,把3份增殖后的培养液做10-1到10-10的浓度梯度稀释,分别取10-5到10-10浓度阶段的菌悬液200uL均匀涂布到LB固体平板培养基上,各做一组平行对照放在35℃的生化培养箱中培养。培养18-24h后,用斜面保存法于4℃冰箱中保存菌种,标明编号、日期。
1.5甲基托布津标准曲线的绘制
(1)以氯仿为萃取剂配成10mg/L、8mg/L、6mg/L、4mg/L、2mg/L的系列浓度的甲基硫菌灵溶液。
(2)用紫外分光光度计,以氯仿为参照液,在267nm的波长下测定各溶液吸光度。
(3)整理数据,绘制甲基托布津标准曲线。
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