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    3)吲哚乙酸(IAA)在污染土壤植物修复中的作用需探寻

    吲哚乙酸(indole-3-acetic acid,IAA)以其能提高植物抗逆性、促进植物根系发育、促进植物生长,开始被应用于植物修复。特别是重金属污染土壤的植物修复,添加 IAA不仅能提高植物抗性,促进植物生长发育,而且和螯合剂联合有效提高了植物对重金属的提取效率[11,12]。

    在有机污染修复方面,国内外仅有零星文献报道添加 IAA 能够促进有机污染物的植物修复[13]。针对PAHs污染,仅有试管培养条件下,IAA提高植物对PAHs抗性的报道[14,15]。因此,PAHs污染土壤能否通过添加IAA来促进植物修复?前期研究表明,IAA添加能够强化植物(黑麦草)修复PAHs污染土壤,其主要机制是:一方面调节土壤微生物群落结构,提高PAHs降解菌的数量和活性,促进土壤中PAHs的降解去除,另一方面也促进了植物生长*751-文*论~文'网www.751com.cn,提高植物对PAHs的吸收和转运。而目前关于IAA促进植物吸收PAHs的机制尚不清楚,需要进一步研究。

    因此,本研究以遗传背景清楚的拟南芥为对象,通过监测IAA处理下论文网,植物体内荧蒽的吸收积累以及酶活性变化,尝试揭示IAA影响荧蒽积累的内在机制。

    1.材料与方法

    1.1材料

    1.1.1试剂与仪器

    荧蒽(Fluoranthene )、吲哚乙酸 3-Indoleacetic acid(IAA)。丙酮:正己烷、愈创木酚、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、邻苯二酚、PH7.8磷酸缓冲溶液(PBS)、PH5.0的醋酸缓冲液等均为分析纯。

    高效液相色谱系统:仪器型号是安捷伦1260型号的HPLC;柱温设定为30℃;该系统装备有一个紫外/可见探测器(LC-20AT, SPD-20A/20AV,日本)和一根Waters PAHC18柱, 5µm,4.6x250mm ,P/N:186001265。柱温设定为30,甲醇(100%高效液相色谱纯作为流动相,流动速率为1.0mL min-1。样品的进样量设定为20 µL,荧蒽的检测波长设定为Ex =270,Em=440nm。

    1.1.2供试植物:

    拟南芥,种子由苏格兰作物研究所提供。

    1.2方法

    1.2.1试验设计

    本研究选择生育期短、植株矮小、容易操作、基因组小的拟南芥为目标植物,目标污染物选择我国土壤中污染较为严重的荧蒽为研究对象。设计平板培养处理,包括0.1mg/L浓度荧蒽污染以及不同浓度10-5、10-6、10-7、10-8、10-9、10-11 mol/L的植物激素吲哚乙酸(IAA),以不添加IAA的处理作为对照。

    取适量拟南芥种子经1ml 75%的无水乙醇,消毒2.5min,用无菌水洗涤5~6次后移至1/2MS培养基的玻璃培养基中,4℃培养3天,促使拟南芥种子萌芽同步,后移苗至倒好1/2MS培养基的方平板中,将的培养皿竖直摆放在定制的架子上,生长14天,整个过程光照培养箱温度调节为22℃,长日照(16小时光照,8小时黑暗)。每个处理种植6盘,共设置4个重复。处理14天后,对植物进行采样。

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