1.3培养基
基本营养:15mM KNO3溶液, 8mM NH4NO3溶液, 2mM CaCl2溶液, 1mM MgSO4·7H2O溶液, 1.5 mM KH2PO4溶液,1/2MS培养基的铁盐、微量元素、有机物,蔗糖20g/L,琼脂6.0g/L,将pH控制在5.8左右
激素组合:1、0.1mg.L-1NAA + 0.25mg·L-1 TDZ + 1.0 g·L-1 PVP
2、0.1mg.L-1NAA + 0.5mg·L-1 TDZ + 1.0 g·L-1 PVP
本实验利用到多种培养基,配置完以后将其分装到玻璃瓶中,扎口,并置于121℃高温灭菌炉中灭菌40min。
1.4接种与观察
将消毒处理好的花芽在无菌条件下切去花器官以外的多余的组织,留下花部位花托朝下接种到配好的培养基上,每瓶接种相应5-6个花芽,置于温度为25+2℃的培养室中暗培养,定期观察培养情况。
实验与结果
2.1不同灭菌时间对花芽培养的效果
2.1.1材料
天香台阁未开放花芽
2.1.2培养基
1、1/2MS + 0.1mg.L-1NAA+0.25 mg·L-1 TDZ + 1.0 g·L-1 PVP
2、1/2MS + 0.1mg.L-1NAA+0.5 mg·L-1 TDZ + 1.0 g·L-1 PVP
2.1.3灭菌处理
将1号培养基分成1A、1B、1C三组,将2号培养基分成2A、2B、2C、三组。取天香台阁未开放花芽若干,用75%酒精浸泡30秒后,用0.1%升汞分别处理1分40秒,2分钟,2分40秒。用无菌水冲洗三次,1分40秒的放入A瓶,2分钟的放入B瓶,2分40秒放入C瓶