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    1  材料与方法
    1.1  供试材料
    供试植物为小麦(扬麦8号),购于江苏省农科院。供试土壤为汤山、栖霞山、汕头三地重金属污染的土壤样本,土壤晾干过100目筛后待用。氨基酸液态有机肥由生物学实验中心提供(为资环院课题组研制,建议稀释倍数为500),实验中所用各项试剂均由生物学实验教学中心提供。
    1.2 试验设计
    1.2.1氨基酸液态有机肥在土壤中的溶解效果分析
    采集汤山、栖霞山、汕头三地重金属污染的土壤样本,晾干后称量。分别称量5.0000g(误差0.0005)土壤于50mL离心管中。将氨基酸液态有机肥分别稀释至10倍 、20倍、30倍、40倍、50倍,每个浓度设置4组重复,并分别设置对照组(对照组的PH值用浓硫酸调节至与施肥组的PH值相同)。向加了土壤的离心管中分别加入3mL稀释过的有机肥。静置后分别于1、2、4、8、16天取样。
    1.2.2氨基酸液态有机肥对小麦的影响
    采集栖霞山样土,烘干后待用。准备33个相同的花盆,每盆称量500.00g土壤填充进去。在每个花盆内均匀撒入25粒小麦种子,并覆上40.00g土壤,每盆浇水50mL后置于阳光房培育。期间每隔两到三天浇水,每盆浇水量保持相同(都为50mL),要始终保持土壤湿润。待小麦苗长势良好时即可间苗(约种植后两周)。每盆留下生长情况相似的小麦苗15株。将氨基酸液态有机肥分别稀释10倍、50倍、100倍、200倍和500倍,对应准备5种去离子水(用浓硫酸调节至与稀释后的液态有机肥的PH值相同)。共设置11种处理,每种处理设置三个重复。
    待麦苗间出现明显差异后即可取样(期间施肥4次)。取样前测量每一盆中的每一株麦苗的株高(土上部分),并做好记录。将麦苗连根拔出(尽量保持根系完整),用清水洗净,并用吸水纸拭干后减去根部,每盆的根、叶、土分别装入信封保存。分别称量每个信封中材料的湿重,并做好记录。称量新鲜小麦叶片测量其叶绿素、丙二醛及可溶性蛋白含量。剩余材料全部放入80℃烘箱,烘干后分别称量干重。
    1.3 分析方法
    1.3.1 氯化钙提取态重金属含量
    向每个离心管中加入20mL0.01mol/L的CaCl2溶液,在200r/min的摇床摇晃2小时(充分混匀)。取出离心管静置半小时以上后过滤(滤液保证在8~10mL),将滤液作好标记,置于冰箱冷藏保存。对这些滤液进行元素分析,比较有机肥在土壤中的溶解效果[15]。
    1.3.2 叶绿素含量的测定
    称取0.1g叶片,剪碎(叶片越小越好)加入5mL试管,加入2mL浸提液(丙酮:乙醇 2:1),隔夜后定容至5mL测吸光值(叶片发白即可)。将管内溶液倒入比色皿,分别在645nm和663nm处测吸光值,
    叶绿素 a(chla) 含量(mg/g) = (12.7×A663-2.69×A645)×V/(1000W) ;
    叶绿素 b(chb) 含量(mg/g)= (22.7×A645-4.68×A663)×V/(1000W);
    叶绿素总含量 (mg/g) = chla含量 + chlb含量。(式中A663、A645分别为相应波长下的吸光度值, V 为提取液体积, W 为所取叶片质量)[16]。
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