摘 要:本文采用红酵母( Rhodotorula )发酵生产类胡萝卜素,并对其产类胡萝卜素的提取方法进行了较详细的筛选和优化研究。结果表明,酸热法是红酵母破壁较理想的方法,其最优条件组合为盐酸的浓度2 mol/L、用量12 mL/0.1 g菌体、浸泡时间40 min和沸水浴时间3 min;丙酮:石油醚=1:1 ( v/v )是从红酵母细胞碎片浸提类胡萝卜素较好的有机溶剂,其参考用量为10 ml/0.1 g菌体。在此破壁和浸提方法的条件下,采用高效液相色谱法( HPLC )测定红酵母中类胡萝卜素的含量。54928
毕业论文关键词:红酵母类,类胡萝卜素,酸-热水解法
Abstract: The extraction methods of carotenoid produced from Rhodotorula fermentation were studied in this paper.The experimental results showed that the method of acid-hot water solution was suitable for the cell repturing from Rhodotorula,and the optimal conditions were as follows: HCL concentration 2 mol/L, HCL addition 12 mL/0.1g (dry cells), soak time 40 min and heating time 3 min. Acetone-petroleumether (1:1 v/v) of 10 ml/0.1 g ( dry cells ) was the best solvent for carotenoid extraction . Under the above optimal conditions, the sample of carotenoid in red yeast ( Rhodotorula ) was analyzed by HPLC.
Keywords: Rhodotorula,carotenoids,acid-hot water solution
目录
1 引言 4
2 材料与方法 6
2.1 材料 6
2.1.1 菌种 6
2.1.2 培养基 6
2.1.3 仪器设备 7
2.2 方法 7
2.2.1 菌株培养 7
2.2.2 干细胞的获得 7
2.2.3 色素提取方法的选择 8
2.2.3.1 研磨法 8
2.2.3.4 细胞自溶法 8
2.2.4 HPLC定量分析色素 8
3 结果与分析 9
3.1 b-胡萝卜素标准品最大吸收波长的确定 9
3.2 b-胡萝卜素标准曲线 9
3.3 提取方法的选择 10
3.4 酸—热水解法提取色素的优化 11
3.5 酵母色素HPLC分析结果 13
结论 15
参考文献 16
致 谢 17
1 引言
在日常的生活生产中,色素越来越发挥着不可替代的作用。特别是在食品行业中,色素在赋予食品诱人的色泽光度,在给我们视觉上的美感的同时,也拉动了消费[1]。
类胡萝卜素(Carotenoids)是一种广泛存在于藻类光合组织、微生物以及植物的颜色呈红色、橙黄色或者黄色的脂溶性四萜烯类化合物[2-4]。类胡萝卜素是由8个类异戊二烯单位组成的一类碳氢化合物及其氧化衍生物。其基本结构是番茄红素,另外其他的类胡萝卜素是由番茄红素氧化、氢化、脱氢、环化以及碳架重排、降解而衍生。一般类胡萝卜素都是C40分子,但是高类胡萝卜素(如C45和C50)和降解的类胡萝卜素(如C30)也是存在的[5]。类胡萝卜素通常分为两大类:胡萝卜素和叶黄素。前者是以-胡萝卜素为代表,仅含碳、氢两种元素,后者是前者的含氧衍生物,比如虾青素。另一种分类方式是将胡萝卜素分为链状、单环和双环衍生物三种,它们的代表化合物分别为番茄红素、γ-胡萝卜素以及-胡萝卜素[6],即类胡萝卜素主要包括虾青素、叶黄素-胡萝卜素、以及番茄红素等[7]。