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e.加入适量的无水硫酸钠除去产物中残留的水分,过滤。
f.拿三块硅胶板,分别在上面点一个样,先后用正己烷:乙酸乙酯(4:1),正己烷:乙酸乙酯(3:1),正己烷:乙酸乙酯(2:1)展开,放入碘缸显色得到黄色的点,看产物
和副产物的分离效果,从而确定洗脱剂的比例。取一皮托管,留样,记为样品1(与纯
化后的产物的Rf值做对照,判断其产物是否已纯化)。
g.取300 g硅胶,用200 mL的二氯甲烷充分溶解,填入硅胶柱中,将二氯甲烷从下方放出,待液面与硅胶持平时,关阀门,加入适量的石英砂,用滤液浸没,放平。
h.将样品缓缓加入硅胶柱中,采用梯度洗涤的方法,先后用正己烷:乙酸乙酯(6:1),正己烷:乙酸乙酯(5:1),正己烷:乙酸乙酯(4:1),正己烷:乙酸乙酯(3:1),正己烷:乙酸乙酯(2.5:1)洗脱。TLC检测,展开剂为正己烷:乙酸乙酯(3:1)比较纯化后的样品与样品1中颜色较深的点的比移值 (Rf值),如果相同,我们视之为中间产物。如果不同,则倒入废液缸中,在继续用梯度浓度的洗脱剂洗脱,直至Rf值相同,即得到中间产物。
i.取一干燥的50 mL圆底烧瓶,称空瓶重量,将洗脱得到的目标中间体溶液倒入圆底烧瓶中,用旋转蒸发仪旋干,再称重量,得到纯的中间产物的质量
2.3.1.1 环(L-羟脯氨酸-L-苯丙氨酸)的环合
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