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1 前言
石榴（Punica granatum L.)为石榴科石榴属落叶灌木或小乔木，原产于地中海至非洲西部地区，主要分布于亚热带及温带地区，在我国南北各地均有种植，分布范围较广，被人们称为果中珍品，受到人们的喜爱。石榴可食用的部分占果实的15%-40%，果实中果汁的含量为36%-61%，既可作为生食鲜果，又可将石榴的各部分应用于中草药配方中。目前，随着我国市场经济的不断发展，石榴的种植面积日益扩大。我国栽培的石榴品种多达100多个，可食用品种占其中的90%，其新产品的加工层出不穷，经济效益显著提高。但是占石榴总重约12.54%的石榴籽[1]常被人们所遗弃，造成大量的资源浪费。石榴籽为石榴废料，近年来关于石榴籽的研究日益增多，据文献报道，干燥石榴中含有14%～27%的石榴籽油，含量极其丰富[2]。石榴籽油中富含多种有效成分，如不饱和甾类化合物、脂肪酸、甘油三酯、磷脂及挥发油。其中不饱和脂肪酸为石榴籽油的主要成分，包括亚麻酸、亚油酸、油酸、棕榈酸等物质[3]。近年来研究发现石榴籽油具有提高免疫力、延缓衰老、保护心血管、防癌抗癌等功效。综上所述，石榴籽油是一种极具开发价值的天然油脂，其功能多样性使它有广泛的应用前景。
阿尔茨海默病(AD)是一种神经退行性疾病，其临床特征是认知能力进行性下降和记忆力减退。神经病理学研究显示在AD中老年斑的核心部分是积聚的β-淀粉样蛋白[4] 。近几年的科学研究已证明Aβ可导致活性氧的产生，从而诱导细胞内氧自由基数量的增加，破坏DNA和让酶失活 [5-7]。也有一些研究表明某些抗氧化剂可阻止Aβ对神经元的毒性，进一步说明Aβ的毒性与氧自由基数量的增加有关[8]。因此，拮抗氧自由基的作用、减少氧自由基的生成或减少Aβ的产生和聚集被认为是AD治疗的几个良好途径。PCI2细胞同时具有肾上腺皮质细胞和交感神经元的特征，已被作为细胞模型广泛用于有关AD的研究[9-10]。本工作主要探究石榴籽油对自由基的清除能力以及对蛋白质、DNA损伤的保护作用，进而观察石榴籽油对过氧化氢诱导的PC12细胞的保护作用，为其应用于神经退行性疾病提供实验依据，为AD中药防治研究提供理论依据。为石榴籽油的进一步开发利用提供有力的实验依据。
1.1 石榴籽油的化学成分
石榴籽油是唯一植物源的多不饱和共轭脂肪酸，含有6种主要脂肪酸：石榴酸、亚麻酸、亚油酸、油酸、棕榈酸和硬脂酸，其中前4种为不饱和脂肪酸，含量极其丰富，是石榴籽油的主要药效成分[11]。石榴籽占石榴果实总重的12.54%，其中纤维素58.76%，占种子重量的一半以上[12]；总糖含量为9.54%，主要是还原糖，占总糖的76%。脂肪酸占种子重量的18.22%；粗蛋白含量为12.30%，以谷蛋白为主，约占蛋白质总量的50%。灰分含量占种子重量的1.19% [13]。另外，还含有甾类化合物、磷脂、甘油三酯、挥发油等。
1.2 石榴籽油的药理作用
科学研究表明石榴籽油具有多种药理作用，如清除人体内自由基，保护人体免疫系统，减慢癌症的发展，预防动脉粥样硬化，帮助人体抵抗癌症、肥胖、糖尿病和心脏病，同时石榴籽油还含有与人体自然产生的雌激素结构相似的植物激素，有助于缓解妇女更年期综合症[14]。因此石榴籽油在医药保健领域有很大的应用前景。
1.2.1 免疫调节作用
石榴籽油能促进小鼠脾细胞内免疫球蛋白的生成，提高体内的B细胞功能。Yamasaki等[15]研究了食用石榴籽油对小鼠免疫功能的影响，实验组每天喂食小鼠含0.12%和1.2%石榴籽油的食物，3周后与对照组对比显示，两组小鼠在体重方面没有差异，但试验组小鼠脾细胞中免疫球蛋白M和免疫球蛋白G均有显著增加，说明石榴籽油有助于提高机体免疫力。