(7)、细菌形成生物被膜后,对抗生素的耐药性可提高很多倍。单个细菌生物被膜中可有多种微生物细菌共生,彼此具有协同保护作用,如产生β-内酰胺酶的菌种可保护不产生此酶的细菌免遭青霉素的杀伤。同时,细菌生物被膜具有使抗氧化剂、过氧化氢、次氯酸盐等失活的能力,并且其失活的速度高于其在细菌生物被膜中扩散的速度,可以使细菌生物被膜内的细菌启动耐药基因,比如使产生抗生素水解酶基因的表达 [26]。
值得注意的是,细菌生物被膜的耐药性和机体的免疫防疫机制不是单一的,往往
有多个机制共同作用。
1.4 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌简介
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (methicillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)具有多重耐药特征,在体外药敏实验时,对苯唑青霉素耐药。按照美国临床实验室标准化委员会(U.S. Committee for Clinical Laboratory Standards,NCCLS)的建议,凡检出mecA基因或青霉素结合蛋白2α(peni2cillin-binding trotein2α, PBP2α)即可定为MRSA[27]。其多重耐药性给临床治疗带来很大的困难,正确认识耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的基因特征、耐药机理及生物学表型对合理用药有重要指导意义。
2 实验部分
2.1 实验材料和实验仪器
2.1.1 实验材料
菌株:耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,来源于江苏省人民医院检验科。
0.1%(w/v)结晶紫溶液、去离子水、75%乙醇、95%乙醇、50%乙醇、天然药物、1%DMSO、接种环、卫生纸、一次性塑料手套若干、酒精灯、量筒、烧杯、试管、吸管、移液管吸头、玻璃瓶若干、血平板若干。其中,天然药物包括鹅掌楸提取物(二氯甲烷、甲醇、乙酯、丙酮、正己烷、H-3、D-4、D-5、Y-2、H-2、H-4、D-2、D-3、物质C)、合成的环二肽(LXP-1、LXP-2、LXP-3、LXP-4、LXP-5、LXP-6、LXP-7、LXP-8、 LXP-9、LXP-10、LXP-11)、白刺提取物(MH-1、MH-2、MH-3、MH- 4、MH-5、MH-6、MH-7、MH-8、MH-9、MH-10)、芦丁提取物等。