5.2 加入银胶后全血溶液荧光光谱随时间的变化规律研究 12
6 分析与讨论 12
6.1 472nm处的荧光峰 13
6.2 509nm处的荧光峰 14
6.3 560nm处的荧光峰 16
6.4 593nm处的荧光峰 18
7 总结与展望 20
7.1 总结 20
7.2 展望 21
致谢 22
参考文献 23
银纳米颗粒对血液荧光增强效果的时间作用研究
1 绪论
血液的成分和人体健康具有密不可分的关系,人的很多疾病能在某一些生化指标上得到反映。人体血液主要由血浆,红细胞,白细胞,血小板等物质构成,临床上经常通过分析血液的这些成分的含量来诊断疾病[ ]。对于血液含量的测定有很多方法,早期人们通过简单的显微镜进行临床血液检验,通过化学反应的方式来判断血液成分,后来随着科学技术的发展,出现了一些新技术如用血液分析仪分类白细胞、通过分子生物学方法进行蛋白质分析等[ ]。但是血液中成分极其复杂,实际应用中对于血液成分的分析却需要非常精准,而传统方法具有不可避免的局限性无法达到临床应用的需求水平,因此人们开始探索将光谱分析技术[ ]应用于生物医学中。光谱分析法是通过分子,原子,团簇等对光的吸收和发射,来研究物质的结构和理化性质的分析方法,这种方法因为前期处理简单,操作难度小,分析所需时间短,检测灵敏度非常高,在很多方面具应用,其中,在血液光谱研究中,荧光光谱的方法应用最为广泛。
荧光现象是指当分子或者原子吸收光的辐射以后变成激发态,发射出和吸收光波长相同或者较之更长的光的现象,它是一种光致发光现象。从产生机理来看,荧光是从电子的第一激发态的最低能级开始,和荧光物质分子原先被激发的能级无关,即分子荧光光谱直接反映分子的结构信息,所以人们可以对对荧光物质的光谱进行定性和定量分析,从而获得物质成分,理化性质等方面的信息[ ]。由于荧光在检测时的入射方向和入射光垂直,可认为是在黑暗背景下进行检测的,所以这种方法比常用的紫外和可见光分光光度法的灵敏度大100-1000倍;荧光光谱的选择性也比分光光度法好,它不仅可以通过特征吸收来鉴定物质,还能检测待测物的发射光谱,根据特征发射进行分析;除此之外,相比于传统方法,它还能提供更多的物理参数且所需的样品更少。这种方法为我们提供了精确分析和认识物质的结构和成分的有效方法,它也是医疗诊断和检测的重要手段。
血液是强散射介质[ ],在血液中存在着非常丰富的荧光物质,比如蛋白质,色素大分子等,所以血液的荧光光谱谱线的吸收峰非常丰富。国内外众多专家学者对血液荧光光谱进行了研究,在疾病检测等方面得到了很多重要成果。苏明权等人通过免疫荧光方法对176例肾病患者和163例非肾病患者的尿液中红细胞膜荧光定位来区别肾性和非肾性血尿从而建立了红细胞荧光定位检查方法[ ]。王彦卿等人运用荧光光谱法研究了茶碱与牛血红蛋白( B H b)的相互作用,考察了茶碱对牛血红蛋白构象的影响[ ]。除此之外,血液荧光光谱在已成功应用于临床检验的荧光显微镜和血细胞计数器,可有效地治疗肿瘤和心脑血管方面疾病低功率激光照射疗法等方面具有应用。
近年来,表面增强荧光效应得到了广泛的关注,它的机理是金属纳米结构和入射波进行等离子共振,使得入射光和周围电场强度得到增强,导致荧光强度发生改变。当在荧光物质中加入金属纳米结构,满足一定条件时就能发生荧光增强效应,使荧光强度得到数倍加强;通过改变相关条件,还能产生荧光强度的猝灭,使荧光强度比原先强度数倍降低。这为荧光光谱的研究分析提供了新的途径。
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