淫羊藿苷抑制血管生成的体外实验研究_毕业论文

　

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摘要目的从药物植物资源中开发血管生成阻断剂是抗肿瘤研究的热点。作为传统抗癌有效药物淫羊藿(Herb Epimedii)，其阻断血管生成的作用研究少见报道。本实验拟探讨其有效提取物淫羊藿苷(icariin, ICA)对血管生成的影响。方法 MTT法检测ICA对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell, HUVEC)生长的影响；流式细胞术分析ICA对HUVEC周期的影响；聚碳酸酯膜小室(Transwell model)趋化运动模型检测ICA对HUVEC细胞运动能力的影响。结果 ICA能抑制HUVEC的生长，其抑制效果与剂量和作用时间相关；ICA作用下HUVEC细胞出现周期阻滞；180 μg/mL的ICA处理HUVEC 6 h，对细胞迁移抑制率为78.0 %。结论 ICA能抑制血管生成，有望成为一种实用的抗肿瘤血管生成靶向治疗药物，但其体内抑血管生成作用还有待于进一步的证实。47885

Objective The traditional Chinese medicine has attracted considerable attention to explore the anti-angiogenes. This study was to investigate the inhibitory effects on angiogenesis by icariin (ICA), which is the extractive of Herb Epimedii. Methods Cell growth inhibitory effect of ICA on HUVEC cells was measured by MTT assay; Cell cycle arrest and the induction of apoptosis were evaluated by flow cytometry; the effect of TCA on migration of HUVEC cells was measured on transwell model. Results The proliferation of HUVEC cells was inhibited by ICA, and the effect was time- and concentration-dependent. ICA displayed growth inhibitory activity against HUVEC cells. ICA-treated HUVEC cells showed cell cycle arrest. 180 μg/mL of ICA decreased the percentage of migrating HUVEC cells by 78.0 %. Conclusions ICA is effective suppresses angiogenesis, which could be developed as an antiangiogenic drug. The inhibition of angiogenesis in vivo has yet to be further confirmed.

毕业论文关键词：淫羊藿苷；人脐静脉内皮细胞株；抗血管生成

Keyword: Icariin; human umbilical vein endothelial cells; angiogenesis

目录

1．引言4

2．材料与方法5

2.1材料5

2.1.1细胞株··5

2.1.2实验药品5

2.1.3实验试剂5

2.1.4实验仪器5

2.2方法6

2.2.1 HUVEC细胞的培养·6

2.2.2 MTT实验6

2.2.3流式细胞术分析细胞周期·6

2.2.4细胞迁移实验··6

2.2.5统计学方法·6

3．结果与分析6

3.1 MTT法检测ICA对HUVEC细胞增殖的影响6

3.2 ICA对HUVEC 细胞周期的影响·8

3.3 ICA对HUVEC 迁移能力的抑制作用8

4．讨论9

5．结论10

6．参考文献··10

7．致谢12

1引言

血管生成是肿瘤快速增殖的关键，是肿瘤侵袭转移的物质基础。肿瘤是一种动态的病理产物，必须从宿主中获取营养才能在局部生长，在其向周围组织浸润的生长过程中，往往伴随着新生血管的生成，肿瘤的转移也是通过新生血管将肿瘤细胞运送到大循环中从而转移到靶器官。肿瘤新生血管的生成一般包括以下步骤：（1）血管内皮基底膜溶解；（2）内皮细胞向肿瘤组织迁移；（3）内皮细胞在迁移前沿增殖；（4）内皮细胞管道化、分支形成血管环；（5）形成新的基底膜。因此，寻找防治肿瘤的方法，主要应从肿瘤形成过程中的生化改变入手，研制肿瘤生成抑制剂，抑制肿瘤生长，控制肿瘤侵袭和转移。

早在1971年，Folkman首先发现了肿瘤血管因子（TAF），首次提出“肿瘤生长依赖血管生成”假说，并提出了“抗血管生成治疗”的概念，认为抑制肿瘤的生长、转移和复发的有效方法是通过抑制其血管生成[1]。与传统的肿瘤治疗相比，抗肿瘤血管生成治疗具有较明显的优势，其受肿瘤耐药性影响小，药物易于到达血管靶细胞，对肿瘤转移有抑制作用，且作用较强，不良反应较小等[2-3]。由此，人们不断深入对肿瘤血管生成的研究，尝试构建一种治疗肿瘤的新方法，其作用机理是通过抑制肿瘤血管生成达到抗肿瘤功效。抑制肿瘤血管生成的途径主要包括：（1）直接抑制内皮细胞增殖；（2）抑制肿瘤血管生成因子（如VEGF）的表达与释放、阻断肿瘤血管生成因子的作用；（3）促进肿瘤血管生成抑制因子（如PF- 4）的表达；（4）抑制蛋白水解酶（如基质金属蛋白酶）的活性，从而抑制基底膜的降解；（5）抑制内皮细胞整合素的作用，阻断血管内皮细胞与基质之间的相互作用；（6）非特异性作用机制，如白介素- 12、钙通道阻断剂等。

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