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2.3 微生物培养 7
2.4 吸光度与藻液细胞密度 7
2.5 土霉素储备液配制(以浓度为1500PPM为例) 7
2.6 染毒 8
2.7 细胞外MC-LR浓度测定 8
2.7.1 常用微囊藻毒素检验方法比较 8
2.7.2 酶联免疫法原理 8
2.7.3 实验方法 9
2.8 总MC-LR（细胞内MC-LR与细胞外MC-LR）浓度测定 10
3. 数据分析 10
3.1 吸光度和藻液细胞密度 10
3.2 MC-LR浓度计算 10
3.3 统计学分析 11
4. 实验结果 11
4.1 吸光度-藻细胞密度标准曲线 11
4.2 染毒48H后藻细胞密度变化 12
4.3 土霉素对细胞外MC-LR浓度急性影响 13
4.3.1 土霉素对水体中（细胞外）MC-LR浓度急性影响 13
4.3.2 土霉素对每105个藻细胞MC-LR（细胞外）释放量的急性影响 15
4.4 土霉素对总MC-LR（细胞内+细胞外）浓度急性影响 16
4.4.1 土霉素对总MC-LR（细胞内+细胞外）浓度急性影响 16
4.4.2 土霉素对每105个藻细胞MC-LR总释放量（胞内+胞外）的急性影响 18
4.5 土霉素对每105个藻细胞胞内MC-LR释放量急性影响 19
5. 结果分析 20
5.1 土霉素对铜绿微囊藻细胞生长的影响 20
5.2 土霉素对MC-LR释放的影响 20
6. 结论 21
致谢 22
参考文献 23
1. 引言
1.1 抗生素简介
1.1.1 四环素类抗生素结构
从表1[8] 和图1四环素类抗生素的结构式、分子式可知，此类抗生素含有以下功能团，即二甲胺基N(CH3)2，酰氨基CONH2，酚羟基(C-10)，此外还有两个含有酮基和烯醇基的共轭双键系统，这两个系统决定了抗生素的颜色和在紫外光区的特征吸收峰[16]。在pH 4～8范围内，此类抗生素以两性离子形态存在，等电点的pH值为5.5。并且此类抗生素在酸性介质中比较稳定，在碱性介质中更容易降解，且在酸性和碱性介质中都能够形成盐[9]。
图1 四环素类抗生素的分子结构式
Figure 1 The molecular structure of antibiotic tetracyclines
表1 四环素类抗生素的分子式和分子量
Table 1 The molecular weight and molecular formula of antibiotic tetracyclines
四环素类抗生素 R1 R2 R3 R4 分子式 分子量 pKaa
四环素（TC） H CH3 OH H C22H24O8N2 444.4 3.3 7.68 9.3
土霉素（OTC） H CH3 OH OH C22H24O8N2 460.4 3.27 7.32 9.11
金霉素（CTC） H CH3 OH H C22H24O8N2Cl 478.7 3.3 7.44 9.27