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表2-4 空白辅料不同波长吸光度值
编号 波长(nm) 吸光度(Abs)
1 282.40 0.051
2 249.80 0.027
通过图2-3空白辅料的扫描结果，在218nm处，辅料吸收较大，也会若选用此最大吸收波长进行测定，辅料会对API的测定结果产生较大干扰，要减小干扰，API更灵敏地显示，应选择API有较大吸收波长，而辅料对其吸收影响较小。结合图2-2及2-3可知，确定检测波长为230nm。
2.3 线性研究（标准曲线的制备）
2.3.1 标准曲线制备方法
线性系指在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比关系的程度。范围系指能达到一定精密度，准确度和线性测试方法适用的高低浓度或量的区间。
精密称取10mg原料于100ml容量瓶中，用pH=6.8磷酸盐缓冲液溶解，超声，用pH=6.8磷酸盐缓冲液超声溶解并定容至100ml容量瓶刻度线，作为母液（100μg/ml）。
再从母液中分别量取1ml、3ml、4ml、6ml、7ml于100ml容量瓶中，用pH=6.8磷酸盐缓冲液稀释，并定容至100ml容量瓶刻度线，分别制成1μg/ml、3μg/ml、4μg/ml、6μg/ml、7μg/ml的溶液。以pH=6.8磷酸盐缓冲液作为空白溶液，调整基线，在检测波长230nm处测定系列标准溶液的吸光度值。
将上述不同浓度梯度的溶液，由浓度低到高，用紫外分光光度计分别测得相应的吸光度值，然后以浓度C为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线。
图2-4 标准曲线
表2-5 各个系列标准曲线溶液的吸光度测定值
编号 浓度(μg/ml) 吸光度(Abs)
1 1.035 0.114
2 3.105 0.331
3 4.140 0.452
4 6.210 0.675
5 7.245 0.794
2.3.2 标准曲线的测定结果
由图2-4，以浓度和吸光度值进行线性回归，可得线性方程：
A=0.10952C-0.00286，相关系数为r=0.99989>0.999。
可见，API在1.035-7.245μg/ml浓度范围内，吸光度值与浓度呈线性。本试验的线性范围和相关系数，均符合标准要求。该分析方法线性关系良好。
2.4 回收率
2.4.1回收率的测定方法
回收率是用以表征方法学准确度的，目的是查看制剂工艺和辅料是否有干扰。一般计算溶出度的回收率的方法是按照溶出结果的50%、80%、100%来确定回收率试验的API浓度。并按照API的量加入相应处方量的辅料（糖丸芯、Talc、HPMC）。精密称取2mg、3.2mg、4mg的API各三份于100ml容量瓶中，并加入辅料，用pH=6.8磷酸盐缓冲液溶解，超声30min，并定容至刻度。取约10ml上述溶液于离心管中，离心15min，使溶液至澄清。用移液管移取上清液1ml于10ml容量瓶中，用pH=6.8磷酸盐缓冲液定容至刻度。用紫外分光光度法，在检测波长230nm处测定吸光度，计算回收率。
2.4.2回收率的测定结果
表2-6 回收率测定值
编号 实测值(μg/ml) 称量值(μg/ml) 回收率(%) 平均回收率(%)
1 1.986 2.02 99.32
99.17
2 2.015 2.06 97.82
3 2.010 2.04 98.53
4 3.220 3.25 99.08
5 3.190 3.20 99.69
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