硫酸亚铁    18.08±0.34    41.68±7.45    5.93±0.95    5.86±0.24
空白2    6.44±0.17    13.75±2.45    5.48±0.83    5.85±0.01
氯化钾    7.15±0.10    14.10±2.00    5.08±0.65    5.81±0.00
磷酸二氢钠    7.04±0.11    10.84±0.33    3.98±0.18    6.57±0.01
磷酸氢二钠    7.13±0.04    12.79±0.03    4.63±0.02    6.31±0.00
 
结果显示添加了硫酸镁的培养基总酶活和比酶活都有较好的提高，可进一步对该种金属离子浓度优化。
4.3离子浓度的优化：
选择镁离子作为最适添加离子后，在基本培养基基础上分别添加不同浓度的MgSO4•7H2O(g/L)：0.1, 0.3, 0.5, 1.0, 1.5, 2.0。结果见如下表4.2。
表4.2镁离子浓度对微杆菌细胞产酶的影响
Mg离子浓度（g/L）    OD值    总酶活(U/L)    比酶活(U/g)    final pH
0.1    8.09±0.19    13.14±0.11    4.19±0.06    5.62±0.06
0.3    8.31±0.14    14.68±1.85    4.55±0.50    5.65±0.04
0.5    10.01±0.19    15.37±1.13    3.96±0.22    5.61±0.07
1    9.74±0.25    18.28±0.34    4.84±0.03    5.54±0.01
1.5    9.93±0.12    17.12±079    4.45±0.26    5.64±0.01
2    10.09±0.14    16.00±0.35    4.09±0.15    5.59±0.01
 
图4.3镁离子浓度对微杆菌细胞发酵产酶的影响
结果显示1g/L的MgSO4•7H2O浓度最佳。

5 产品方案
5.1产品名称与性质
名称：生物素中间体二酯
中文别名：环酸
英文名：1,3-Bisbenzyl-2-oxoimidazolidine-4,5-dicarboxylic acid
分子式：C19H18N2O5
性  质：白色梭柱体结晶。

5.2性状及理化性质
分子量：382.41g/mol
密  度：1.278g/cm3
熔  点：111.5℃
溶解性：易溶于醇、醚和乙酸乙酯，微溶于冷石油醚，在水中为溶。
稳定性：稳定

5.3产品的质量规格
产品的收率大于95%（按二酸计算），经液相色谱分析，产品纯度>99.0%
二酸工业品（>99%）,无水甲醇（AR），三甲基氯硅烷（AR）

5.4产品的生产制度
工业化日产量：788.4 kg
平均工作日：300天
工业化年产量：236.52吨/年

5.5包装与储藏
CAS编号：59564-78-2
包装方法：固态：塑料袋或二层牛皮纸袋外全开口或中开口钢桶；螺纹口玻璃瓶、铁盖压口玻璃瓶、塑料瓶或金属桶（罐）外普通木箱；螺纹口玻璃瓶、塑料瓶或镀锡薄钢板桶（罐）外满底板花格箱、纤文板箱或胶合板箱[5]。
储存：密封阴凉保存。
6生产方法与主要工艺流程
6.1生产方法
使用间歇式反应，在常压下用二酸，甲醇与三甲基氯硅烷反应，制取二酯。

6.2主要流程：
7生产工艺控制和中间体质量标准
7.1生产工艺控制
影响此反应的主要因素有：配料比、三甲基氯硅烷的用量和添加时间、反应时间、反应温度等。 年产200吨生物素中间体二酯的合成工艺以及生产车间设计(7):http://www.751com.cn/yixue/lunwen_3353.html