⑴取出细菌的培养液2-4 ml，10000 rpm离心1 min，离心结束后要去除上清液，再向管中加入200 ul的缓冲液GA，震荡至菌体成悬浮状。

⑵向管中加入20 ul的10 mg/ml Proteinase K溶液，震荡混匀（震混匀标志：液体变得清亮粘稠）。混匀后，向管中加入220 ul的 GB缓冲液，震荡15s，70 ℃环境下放置10 min，此时溶液应变清亮，低速短时间离心，以此来除去管壁内壁上残留的水珠。来!自~751论-文|网www.751com.cn

⑶如果出现白色沉淀，可以放置在70 ℃环境下，对后续实验不会产生影响。如果溶液未完全变清亮，则说明细胞没有完全裂解，可能导致所提取的DNA量比较少或不纯。

⑷向管中加入220 ul的无水乙醇，充分混均，震荡15 s，除去管壁内壁上残留的水珠。然后先以12000 rpm的速度离心30 s，将废弃液倒掉，同时将吸附柱放入收集管中。

⑸向吸附柱中先加入无水乙醇，再加入500 ul GD缓冲液，以12000 rpm的速度离心30 s后，将废弃液倒掉，同时将吸附柱放入到相对应的收集管中。

⑹向吸附柱中先加入无水乙醇，再加入600 ul PW漂洗液，以12000 rpm的速度离心30 s，将废弃液倒掉，同时将吸附柱放入到相对应的收集管中。此步骤再重复一次，向吸附柱中先加入无水乙醇，再加入600 ul PW漂洗液，以12000 rpm的速度离心30 s，将废弃液倒掉，同时将吸附柱放入到相对应的收集管中。