2、一手拿着锥形瓶，将锥形瓶的瓶口在酒精灯的外焰迅速的过火，起到一个杀菌的作用，防止在倒平板的时候培养基流过瓶口沾染上杂菌，影响实验结果。 

3、将培养皿打开一个口子，然后在酒精灯外焰附近将锥形瓶中的培养基倒入培养皿中`751|文\论*文-网www.751com.cn，大约倒5ml可以将皿底盖过即可，此时立即将培养皿的皿盖盖上，用手上下轻轻摇晃培养皿使之摇匀匀。 

4、待培养基凝固以后，再倒一次平板，将培养皿打开一个口子，然后在酒精灯外焰附近将锥形瓶中的培养基倒入培养皿中，这一次大约倒10ml，以无菌操作在培养基表面直接垂直放上牛津杯,在杯中加入200微升质量浓度分别为5、10、25、50、100mg/ml的原液，置37℃培养16-18小时，观察抑菌圈大小。以出现抑菌圈的最低质量浓度为萃取物对金黄色葡萄球菌的MIC。

2.3.4 细胞裂解率的测定

将金黄色葡萄球菌培养12h后离心、用无菌水进行洗涤以后再悬浮于5mL 20mmol/L磷酸盐缓冲溶液中(pH 6.0)，分别添加0、10、25、50、75、100mg/mL的萃取物溶液0.5mL于金黄色葡萄球菌悬浊液中，置于37℃培养至12h，分别于6、12h时测定650nm波长处的吸光度[12]。

以下式计算细胞裂解率。

L/%=(1－A0/At)*100

式中：L为细胞裂解率/%；At为6h或12h的吸光度；A0为开始时的吸光度。

pH 6.0的磷酸盐缓冲液制法：0.05mol/L  NaH2PO4 ， 87.7ml，0.05mol/L  Na2HPO4 12.3ml。