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每种溶剂分别做三次平行实验，分别对土壤中阿文菌素标准品进行萃取，然后通过高效液相色谱测得每种溶剂中萃取所得的阿文菌素浓度，计算其回收率，从而挑选出合适的萃取溶剂。实验数据如表（2）所示：
项目 峰面积 计算浓度（mg/L） 回收率 均值
甲醇-1 6319782 179.69 89.85% 90.46%
甲醇-2 6316303 179.59 89.80%
甲醇-3 6452515 183.47 91.73%
二氯甲烷-1 1458687 41.48 20.74% 22.63%
二氯甲烷-2 1690894 48.08 24.04%
二氯甲烷-3 1626053 46.23 23.12%
丙酮-1 6240365 177.43 88.72% 90.08%
丙酮-2 6607276 187.87 93.93%
丙酮-3 6160562 175.16 87.58%
表（2） 三种溶剂对阿文菌素的回收率
通过表（2）可以看出，在这三种溶剂中，二氯甲烷对阿文菌素的萃取效果较差，平均萃取率只有22.63%，不能够满足本实验的分析前处理的要求；而甲醇和丙酮这两种溶液对于土壤中的阿文菌素来说具有相似的萃取效果。都能够满足对土壤中阿文菌素的萃取分析要求。这两种有机溶剂都有一定毒性，但相比较而言，甲醇的毒性较大，其对人体的神经系统和血液系统影响最大，经消化道、呼吸道或皮肤摄入都会产生毒性反应，而甲醇蒸气更能够损害人的呼吸道粘膜和视力。因此，经过综合考虑后，选择采用丙酮作为对土壤中阿文菌素的萃取溶剂。
4.3.2 阿文菌素的提取
称取20g样品，置入250mL三角瓶中，再加入80mL丙酮，置于摇床上采用120rpm转速振荡2h后静置过夜。静置然后采用0.7um的玻璃纤文滤膜过滤，并采用40mL丙酮分两次清洗土壤，合并滤液。于40℃恒温水浴中，旋转蒸发将滤液浓缩至近干。再次加入10mL甲醇，氮吹至完全干，用甲醇定容至1mL后上机检测。加标实验结果表明此前处理方法可行。
第五章 阿文菌素的残留与降解研究
5.1 阿文菌素的降解研究
5.1.1 研究方法的建立
采用建立的前处理方法和分析方法对阿文菌素在土壤中的降解情况进行了研究。
采用施药前的土壤样品，研究了阿文菌素在该土壤中的生物降解行为。研究中采用20g经风干磨碎并过60目筛的土壤样品，并加入5.6mL灭菌后的蒸馏水，使土壤达到其饱和含水率的60%。加入蒸馏水后，将三角瓶置于25℃，湿度为75%的恒温恒湿培养箱中预培养7天。预培养结束后，将其中10个三角瓶经高温灭菌，作为无菌对照。然后分别向各三角瓶中加入受试物（阿文菌素溶液，每三角瓶加入500uL，使该体系中阿文菌素最终浓度为10 mg/kg），继续培养。培养过程中保持无光照。本试验共进行21天，分别在第0、1、3、5、9、14、17、21天进行取样，除对照组外，每天设置三个平行样品。样品取出后，经冻干脱水，前处理后上机检测其浓度。
5.1.2 研究结果
用本文建立的分析方法分别对对照样品和添加受试物的样品进行检测，得到阿文菌素色谱图，如图（5）所示。将图中的峰面积转换为阿文菌素浓度，可得到如表（3）所示实验数据。
图（5）阿文菌素第三天时所测得的色谱图
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