菜单
  

    HP-8: TTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTAAAAAAAA

    HP-10: TTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTAAAAAAAAAA

    HP-12: TTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTAAAAAAAAAAAA

    1.3实验步骤

    实验的准备:实验用DNA链均用MOPS缓冲液溶解成30 M,分装保存备用。先将分装的DNA链取出一管,稀释成15 M,淬火处理后室温保存备用。

    取7个容量为0.6 mL的离心管,分别标记为1~7,加入10 µL(15 M HP-12),然后分别加入36 µL、38 µL、35 µL、38 µL、39 µL、39.5 µL、40 µL的MOPS缓冲溶液,混匀后,加入Exo Ⅲ凑成50 µL反应液,再混合均匀,在37℃恒温水浴锅中反应1h。-源^自,751<文.论(文]网>www.751com.cn接着分别加入230 µL MOPS缓冲溶液,10 µL(60 mM)抗坏血酸钠溶液(现配),振荡混匀后,加入CuSO4(6 mM)溶液10 µL,于25 ℃恒温水浴锅中放置10 min。然后进行荧光检测,并做好实验记录与数据处理。参数设置:激发波长为360 nm,收集波长的范围为520-700 nm,数据导出后用Origin 8.0作图软件进行数据处理。

    2结果与讨论

    2.1实验原理和DNA探针设计

    本方法是利用Exo Ⅲ降解HP生成游离的Poly T,然后以此作为合成荧光Cu NPs的模板,进而非标检测Exo Ⅲ的活性。实验原理如图1所示:图中为一条单链DNA,其3'端附近的碱基(8~12个A)可与中间部分的碱基T进行互补杂交,于缓冲溶液中淬火处理,该DNA可自杂交形成发夹结构(HP,如图1所示)。而HP 5'末端突出一段单链Poly T序列,但由于其碱基数目过少,不能有效合成荧光Cu NPs

  1. 上一篇:N-[5-(4-溴苯基)-1,3,4-噻二唑-2-基]-N'-4-氟苯甲酰基脲的合成与结构表征
  2. 下一篇:纳米二氧化硅的制备与表面改性
  1. 基于非对称六羧基配体的...

  2. 基于AspenPlus乙酸乙酯反应精馏模拟

  3. 基于(S)-(-)-1,1'-联(2-萘酚...

  4. 基于帕莫酸类配体的金属...

  5. 基于醚四酸MOFs的构筑及其对pH的传感

  6. 西江广西段水质现状及其评价

  7. 基于V型配体稀土MOFs的构筑及其结构研究

  8. 河岸冲刷和泥沙淤积的监测国内外研究现状

  9. 大众媒体对公共政策制定的影响

  10. 酸性水汽提装置总汽提塔设计+CAD图纸

  11. 杂拟谷盗体内共生菌沃尔...

  12. 电站锅炉暖风器设计任务书

  13. java+mysql车辆管理系统的设计+源代码

  14. 中考体育项目与体育教学合理结合的研究

  15. 乳业同业并购式全产业链...

  16. 当代大学生慈善意识研究+文献综述

  17. 十二层带中心支撑钢结构...

  

About

751论文网手机版...

主页:http://www.751com.cn

关闭返回