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    11

    3.2 标准曲线方程的确定 11

    3.3 女贞叶样品不同提取方法的比较结果 12

    3.3.1 乙醇溶剂的回流与超声提取法 12

    3.3.2 工业酒精+不同浓度的NaOH溶液超声提取最佳百分数的确定 12

    3.3.3 乙醇溶剂的超声与乙醇溶剂+6%NaOH溶液的超声提取法 13

    4 提取 14

    结 论 15

    参考文献 16

    致  谢 17

    1 绪论

    女贞叶为木犀科植物女贞(Ligustrum lucidum Ait)的叶[1], 别名冬青叶、土金刚叶、爆竹叶,生于山野,多裁植于庭院分布华东、华南、西南及华中各地[2]。女贞叶有较长的使用历史,其具有祛风、明目、消肿止痛的功效。主要用于治疗头目昏痛、风热赤眼、疮肿溃烂、烫伤等疾病[3],现代研究表明女贞叶提取物还有降低血脂,镇咳祛痰,调节免疫[4~6]等药理作用,近几年临床还使用女贞叶治疗口腔炎[7],是具有开发价值的药用资源。

    据文献[8]报道,女贞叶乙醇提取物中三萜化合物总量超过70%,其中齐墩果酸和熊果酸总量在35%~45%,是女贞叶的主要药效成分。

    齐墩果酸的结构                          熊果酸的结构 

                           分子式:C30H48O3     分子量:456.71

    齐墩果酸(Oleanolic acid,OA)为白色针状结晶,无,不溶于水,可溶于甲醇、乙醇、氯仿、乙醚、丙酮等有机溶剂,是五环三萜类化合物,以游离体和糖配体的形式存在于多种植物中。齐墩果酸毒性低,具有多种生物活性,抗病菌、消炎、增强免疫、抑制血小板凝集、降血脂、降糖、保肝、护肾、抗艾滋病毒等作用;特别是对恶性肿瘤化疗造成的免疫功能下降的恢复和对抗结核药物的肝损害的保护意义重大[9]。

    熊果酸(Ursolic acid, UA)又名乌索酸,是存在于天然植物中的一种五环三萜类化合物,主要分布在女贞子、山楂、夏枯草等植物中,熊果酸高含量为有光泽的棱柱状(无水乙醇)或细毛样针状结晶(稀乙醇),低含量为棕黄色或黄绿色粉末,具有特殊的气。易溶于二氧六环,吡啶,溶于甲醇、乙醇、丁醇、丁酮,略溶于丙酮,微溶于苯、氯仿、乙醚,不溶于水和石油醚[10]。熊果酸毒性小,具有抗白血病活性,能有效地抑制P3HR1细胞及慢性髓性白血病细胞K562的增殖[11]。

    由于齐墩果酸和熊果酸的结构比较复杂,人工合成步骤较为繁琐,目前仍主要依赖于从植物中提取。因此,从女贞叶中提取齐墩果酸和熊果酸对于开发女贞叶的药用价值及其农副产品的综合利用有重要的意义。源.自|751,:论`文'网www.751com.cn

    淮安市有大量的女贞树,因而有大量的女贞叶资源。但由于未对其进行开发研究,使这一资源白白浪费。本研究应用回流提取、超声提取和超声加碱液提取法,并采用高效液相色谱法进行含量测定分析。比较了用不同的提取方法及工艺从女贞叶中提取齐墩果酸和熊果酸,其目的在于寻找适宜从女贞叶中提取齐墩果酸和熊果酸的工业化方法,为今后进一步开发利用这一资源提供基础研究。

    2 实验部分

    2.1 仪器、试剂与材料

    仪器:Agilent1260高效液相色谱仪(美国);KQ-100VDB型三频数控超声波清洗器;HH-2恒温水浴锅;SHB-III 循环水式多用真空泵;旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);500克摇摆式高速万能粉碎机;低速离心机(长沙湘智离心机仪器有限公司);数显恒温水浴锅(国华电器有限公司);T-214电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司);玻璃仪器气流烘干器。

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