T(%)=Tr/T0 (1)
薄膜不透明度的计算如公式(2)所示。其中Abs600是薄膜在600nm下的吸光度,X为薄膜厚度(mm)。
Opacity=Abs600/X (2)
2.2.4 薄膜的颜色
壳聚糖-植物精油可食性薄膜的颜色用色差计测定,其中白板的参数为L*=91.00,b*=4.44,a*= -0.99。把薄膜放在标准白板上,读取相应的L*值。每个处理重复10次。
2.2.5 薄膜对生猪肉微生物特征的影响
截取30*30cm正方形薄膜,取5份100g猪肉糜,一份直接测总菌数,其余用壳聚糖薄膜包裹后在4 ℃下贮藏一周后测总菌数。总菌数测定采用Siripatrawan和Noipha(2012)的方法[18],即称取5g样品,加到装有玻璃珠的45ml无菌生理盐水中,充分震荡混匀后梯度稀释。吸取适宜浓度的稀释液100μl加到PCA平板上,涂布均匀。将培养皿倒置于28℃恒温培养箱中培养2天,记录平板上的菌落数。每个处理3个平行,每个平行重复2次。
2.2.6 TBA(硫代巴比妥酸)法测定薄膜对肉糜抗氧化性的影响
称取200mgTBA溶解到100ml正丁醇中,配置成TBA反应液,放到冰箱中(不超过一周),待用。200mg肉放到25ml容量瓶中,加入1ml正丁醇来溶解样品。定容到刻度,充分混匀。取5ml溶解后的样品加入干燥的试管中,加入5mlTBA反应液。试管加上盖子,混匀,放到95度120 min,冷却后在532nm下测定吸光度,同时记录正丁醇(空白对照)的吸光度值。其中以蒸馏水作为参比。储藏期间,分别在第3、5、7、9天取样测定TBA值。每个处理进行两次平行实验[19]。
2.2.7 DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)法测定薄膜对肉糜抗氧化性的影响
分别于第3、5、7、9天取样,进行DPPH试验,每个处理两个平行。具体步骤参照Tape的方法:取0.10g样品,加到DPPH浓度为0.004%的无水乙醇(5ml)中,室温下于暗处放置2h并不断震荡。然后在517nm下测定吸光度值,无水乙醇作为空白对照。试验结果以吸光度表示,吸光度值越低,表明薄膜的抗氧化能力越强[20]。
2.2.8 薄膜对肉糜pH的影响
称取样品10g,剪碎后用90ml煮沸过的双蒸水溶解,振荡30min,4000r/min离心20min。取上清液测定pH值。分别在储藏期间的第0、1、3、6、9天测定。每个处理两个平行。猪肉pH是检测其新鲜与否的重要指标,病肉和不新鲜肉的pH都大于6.2[21]。
2.2.9 薄膜对肉糜过氧化物酶的影响
分别在储藏的第0、1、3、6、9天取样,探究薄膜对肉糜过氧化物酶的影响。吸收肉浸液2ml,注入小试管内,先滴入联苯胺酒精溶液5滴(0.25mL),再滴入过氧化氢2滴(0.10mL),振荡后,在2min内观察结果。1-2min内呈蓝绿色的样品为新鲜猪肉,2min后显色或不显色的样品为变质肉[22]。
2.3数据统计与分析
运用SAS软件(SAS Institute, version 8.0,Cary ,NC)进行分析,所有实验数据均采用ANOVA进行邓肯氏差异分析方法进行分析(p<0.05)。
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