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        2.1.1 主要仪器    10
        2.1.2 主要试剂    10
        2.1.3 培养基    10
      2.2 实验内容    10
        2.2.1菌丝体培养    10
        2.2.2 灵芝菌丝体三萜类化合物的提取及萃取    11
        2.2.3菌皮、菌丝体和发酵液95%醇提物的HPLC分析    12
    3实验结果与讨论    13
      3.1 灵芝的两阶段发酵    13
      3.2灵芝菌皮和菌丝体的浓缩与提取    13
      3.3灵芝菌丝体醇提物的HPLC分析    13
        3.3.1高效液相色谱法    13
        3.3.2 20%醇提物核苷混标的HPLC图谱分析    14
        3.3.3上层和下层菌丝体中三萜的变化情况    15
      3.4 菌丝体醇提物中氯仿部分的分离纯化及化合物结构的测定    16
        3.4.1菌丝体醇提物中氯仿部分的分离纯化    16
        3.4.2 化合物的结构鉴定    17
    4结论    20
    致  谢    21
     参考文献    22
    1 前言
    1.1 研究背景
    1.1.1食药用真菌
        食药用菌俗称“蘑菇”,它由木质、肉质、革质子实体三部分构成,并还具有食用和药用价值的真菌[1]。在中国早就有对食药用菌进行的记载。后来随着科学的进步,人们逐渐加深了对食药用菌的生物学和生产技术的认识。食药用菌主要包括银耳、香菇、灵芝、虫草等。现代研究结果表明它们具有很高的营养价值和药用价值。高蛋白性、低脂肪含量、低能量等特性是食药用真菌重要的营养价值;抗肿瘤作用、降血脂作用、保肝作用、降血糖作用、抗菌作用等体现了其重要的药用价值[1]。
    近年来,随着人工栽培技术的成熟和液体发酵技术的发展,食药用菌产业在我国得到迅速的发展,为了解食药用菌的生物活性,我们有必要运用现代的科学技术,对食药用菌进行系统的研究,以发挥其更大的营养和药用价值。
    1.1.2灵芝
         灵芝属于担子菌门(Basidiomycota),伞菌纲(Agaricomycetes),多孔菌目(Polyporales),灵芝科(Ganodermataceae) [1],属药用真菌。
        灵芝俗称灵芝草、仙草,灵芝在药用方面在我国有悠久的历史。《神农本草经》记载有“赤芝性平,苦,补中,益心气,增智慧,不忘延年” [2] 。《本草纲目》记载灵芝有“益心气,入心充血,助心充脉,益脾气,安神,益肺气,补肝气,治耳聋,坚筋骨,利关节”的功效[3]。这些古籍说明在古代人们就认识到灵芝的药用价值。在2000年,《中华人民共和国药典》收录了两种灵芝:赤芝(Ganoderma licidum(Leyss.ex Fr.) Karst)和紫芝(Ganoderma sinensis Zhao,Xu et Zhang),并规定赤芝和紫芝的子实体均为药用部位,并介绍了灵芝的特性、功能与主治[4]。另外我国国家卫生部公布的可用于保健真菌的名录中,就有赤芝、紫芝和松杉灵芝(Ganoderma tsugae Murr)。
    1.2 研究现状
    1.2.1 灵芝中的化学成分
        目前人们从灵芝的子实体、菌丝体和孢子粉中已经分离出不同种类的化合物,主要有灵芝三萜类化合物、多糖类化合物、核苷类化合物、生物碱类化合物、呋喃类化合物、甾醇类化合物以及多肽类化合物等多种活性物质[5]。查阅文献得知灵芝中的主要的活性成分是多糖类化合物、三萜类化合物、甾醇类化合物。
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