采取新鲜绿叶,放平,以精确到1mm的标尺放于一侧作为参照。用相机拍摄成图后,将相片输入电脑,用Image J软件进行处理,测出该叶片表面积大小。
2.1.4 实验方法
选择不同湿度条件的天气,分别采摘叶片。
2.2 失水速率测定
2.2.1 实验材料
茶梅叶片
2.2.2 实验仪器与设备
剪刀、记号笔、标签、电子天平。
2.2.3 实验方法
采下不带露水、外形无损伤的鲜叶,放入事先准备好的干净烧杯中,带回实验室,用电子天平立即称重。随后,放置在适当的环境条件下,设置若干个时间段分别称重,记录。用其数据可计算出茶梅叶片离体后的失水速率。
2.2.4 实验条件
选择气候较干旱的晴天采摘叶片,叶片上不可沾有露水。
2.3 相对含水量测定
2.3.1 实验材料
茶梅叶片
2.3.2 实验仪器与设备
剪刀、电子天平、记号笔、报纸、烘箱。
2.3.3 实验方法
选取不同株的叶片,去除其主脉,剪成小块,分别称取约0.4g,即样品鲜重(Wf)。放入小烧杯中吸水24h后称饱和重(Wt),然后将叶片用报纸包裹好,放入80℃烘箱中烘干48h后称干重(Wd),计算样品相对含水量如下式。重复三次,取平均值。
RWC= [(Wf-Wd)/ (Wt-Wd)]*100%
2.3.4 实验条件
选择较干旱的晴好天气采摘叶片。
2.4 质膜相对透性(以相对电导率表示)测定
2.4.1 实验材料
茶梅叶片
2.4.2 实验仪器与设备
烧杯、电子天平、胶头滴管、滤纸、剪刀、镊子、刻度试管、试管架、玻璃棒、玻璃塞、记号笔、标签、电导仪、沸水浴。
2.4.3 实验方法
浸泡法[14]:取若干大小相当的茶梅叶片(尽量保证叶片的完整性,少含茎节),用自来水洗净后再用蒸馏水冲洗三次,用滤纸吸干表面水分,将叶片剪成适宜长度的长条(避开主脉),快速称取鲜样三份,每份0.1g,分别置于10ml去离子水的刻度试管中,盖上玻璃塞置于室温下浸泡处理12h。用电导仪测定浸提液电导(R1),然后沸水浴加热30min,冷却至室温后摇匀,再次测定浸提液电导(R2)。
相对电导率= R1/R2*100%
2.4.4 实验条件
选择较干旱的晴好天气采摘叶片,叶片浸泡时需在室温下。
2.5 可溶性糖含量测定
2.5.1 实验材料
茶梅叶片
2.5.2 实验仪器与试剂
分光光度计、恒温水浴、量筒、烧瓶、电子天平、烘箱、刻度试管、记号笔、标签、漏斗、滤纸、试管架、蒸馏水、活性炭、乙醇、浓硫酸、葡萄糖、蒽酮。
2.5.3 实验方法
(1) 准备实验试剂
葡萄糖标准液:称取已在80℃烘箱中烘至恒重的葡萄糖5mg,用80%乙醇制成50ml溶液,即得每毫升含糖为100μg的标准液。
蒽酮试剂:称取0.276g蒽酮,溶解于276ml稀硫酸(将228ml相对密度为1.84的浓硫酸用蒸馏水稀释成300ml)溶液中,置于棕色瓶中,需当日配置使用。
(2) 可溶性糖的提取
把茶梅叶片放在110℃烘箱烘15min,然后调至70℃过夜。干叶片磨碎后称取50mg样品倒入10ml刻度离心管内加入4ml 80%乙醇,置于80℃水浴中不断搅拌40min,离心,收集上清液,其残渣加2ml 80%乙醇重复两次,合并上清液。在上清液中加10mg活性炭,80℃脱色30min,80%乙醇定容至10ml,过滤后取滤液测定。
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