(3) 绘制标准曲线
取20ml带塞试管,编号,按下表配置系列浓度的标准葡萄糖溶液。然后在每支试管中加入5ml蒽酮试剂,混匀,盖上塞子,在沸水浴中煮沸10min(水浴重沸后计时),取出,立即用水冷却至室温,在620nm波长下,分别测量各管的光密度值,用0号管调零。以光密度为纵坐标,葡萄糖含量为横坐标,绘制标准曲线。
管 号 0 1 2 3 4 5 6
葡萄糖标准液(ml) 0 0.1 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0
80%乙醇(ml) 1.0 0.9 0.8 0.6 0.4 0.2 0
葡萄糖含量(μg) 0 10 20 40 60 80 100
(4) 测定
吸取上述糖提取液1ml,加入5ml蒽酮试剂混合,用上述同样的方法,在620nm处测得OD值,以0号管调零。由标准曲线查得提取液中的糖含量,然后根据每毫升提取液含有5mg干样品中的糖,再行计算样品中含糖百分数。
2.5.4 实验条件
选择较干旱的晴好天气采摘叶片。
3 分析
每个实验重复三次求出平均值和标准偏差,进行分析与讨论。
3.1 实验数据的处理与分析
3.1.1 茶梅叶面积分析
植物生长受抑制是干旱胁迫所产生的最明显的生理效应,依据实验结果可推断干旱胁迫使植株新生叶片叶面积变小。从图 1中可以大致判断,3、4月的大气湿度相较于5月份来说略偏干旱。在这样的大环境下,本实验分别从这三个月中随机挑选三天测量茶梅的叶面积大小,如图 2,记录了依次在37%、26%、62%的日空气湿度下,从三棵茶梅上新鲜采摘的叶片叶面积大小,可以计算得叶片面积平均数分别为8.988、9.079、11.792平方厘米。可以看出在相对较低湿度的情况下,茶梅鲜嫩叶片叶面积较小。这可能是由于干旱胁迫致使植物的叶片细胞分裂能力下降,叶面积扩展缓慢[1]。叶面积减小可以使植物文持一定的光合作用和蒸腾速率,从而控制失水以适应水分亏缺的环境条件,有利于水分的保持和水分利用率的提高。结果表明,茶梅叶片在干旱条件下有适应性变化,是抗旱力的表现。
图 1 2013年3、4、5月天气情况
图 2 茶梅叶面积
3.1.2 茶梅叶片失水速率分析
本实验在三个不同干旱条件环境下进行,以此测试茶梅的抗旱能力。就图 3可知,茶梅叶片的失水速率在逐渐平缓,失水量在整体上呈下降趋势。叶片失水速率随着胁迫程度的加强呈下降趋势,这说明植物通过减小叶片失水速度的方式来抵御干旱胁迫[15]。此外,相较于实验一和实验二,处于较干旱条件下的实验三茶梅叶片总体失水速率更低,即更能抗旱,这可能是由于茶梅通过适应环境变化及自我调节增加了抗旱的能力,使得叶片失水更慢,保水力更强。再观图 4,茶梅相比金边黄杨抗旱性较强,但明显没有枸骨的强,且茶梅抗旱性比海桐稳定。故,初步判断,茶梅应具备一定的抗旱力,但抗旱力不强。
图 3 茶梅叶片失水速率
图 4 茶梅、枸骨、海桐、金边黄杨失水速率的比较
3.1.3 茶梅叶片相对含水量分析
相对含水量的大小,反应了植物体内生理生化代谢的活跃程度,可作为比较不同植物保水能力、需水程度、抗旱性相对大小的水分生理指标。本实验在不同的自然干旱胁迫下进行,由于不同时期的环境不同,茶梅也表现出了不同的变化,叶片相对含水量呈缓慢下降的趋势。水分散失主要由叶片来承担,从图 5中可知,茶梅在三个不同时期的叶片相对含水量都文持在75%以上,说明茶梅在面对干旱时,有一定的叶片保水、抗脱水能力,文持着相应的生理代谢功能。而且其叶片含水量变化不明显,说明其抗旱力具有稳定性。
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