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摘要：由土传青枯菌Ralstonia solanacearum侵染番茄引起的番茄青枯病是番茄主要病害之一，由于其病原菌在环境中适应突变能力强，一直都缺乏有效的防治手段，化学防治虽然有一定效果，但随着青枯菌抗药性、耐药性的提高，大田防效越来越差，而且化学药剂的使用会对大田的的环境造成破坏，改变土壤微生物群落的种群多样性，且农药残留对人类健康也带来很大的危害。本研究从生物防治的角度出发，在江苏、浙江、湖南、江西等四个省份采取的青枯病健康发病的番茄根际土样，分离纯化出四株抵抗番茄青枯病的专性噬菌体，研究其生物学特性，从而为噬菌体防控青枯病提供有效的理论依据。29029
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毕业论文关键词：番茄青枯病、专性噬菌体、分离纯化、生物学特性
Study on Isolation, Purification and Biological Characteristics of Lytic Phages Infecting Ralstonia solanacearum
Student majoring in Agricultural Resources and Environment Ningxi Genqiuquzhen
Tutor Wei Zhong
Abstract: Tomato bacterial wilt which is caused by Ralstonia solanacearum is one of the main diseases of tomato. Because of its strong ability to adapt to the environment, we are always lacking of effective means to prevent and control this disease. Chemical agents may be effective in short term, however, with the rapidly evolving resistance of R. solanacearum, the efficiency of control is getting worse. Meanwhile, the abuse of chemicals such as antibiotics can contaminate the environment and destroy the persity of soil microbial community, furthermore, pesticides cause great harm to human health. From the perspective of biological control, we sampled rhizosphere soils from diseased tomato in Jiangsu, Zhejiang, Hunan, and Jiangxi. Then we isolated and purified four specific phage strains which have stronger lytic effect on R. solanacearum. By studying the biological characteristics of those phages, we can provide basic information for phage control of bacterial wilt.
Key words: Tomato bacterial wilt; Specific phage; Separation and purification; Biological characteristics
目 录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法2
1.1供试材料 2
1.2实验方法 3
1.2.1强致病力青枯菌活性鉴定3
1.2.2青枯菌专性噬菌体的分离纯化3
1.2.3噬菌体鉴定与生物学特性研究3
1.3数据处理5
2结果与分析5
2.1噬菌体分离纯化结果5 2.2噬菌体生物学特性测定结果 5
3讨论7
参考文献8
图1供试病原菌2
图2青枯菌专性噬菌体筛选的示意图3
图3青枯菌专性噬菌体平板照片5
图4一步生长曲线6
图 5噬菌体对温度的耐受能力7
图 6噬菌体对pH的耐受能力 7
表1不同噬菌体的效价5
表 2最佳感染复数5
青枯菌专性噬菌体的分离纯化以及生物学特性研究
引言 早在1896年，英国的微生物学家Ernest Hankin就发现了噬菌体的身影，他在印度河水中发现了一种具有强灭菌活性的物质，它可以通过磁质滤器，被热水煮沸后灭菌活性则丧失，但遗憾的是Ernest Hankin没有进行更近一步的研究；1898年，类似的现象也出现在了俄罗斯细菌学家Gamaleya的研究中[1]；到了1915年，英国微生物学家Frederick Twort首次观察到了金黄色葡萄球菌平板上的透明斑，并进一步提出了病毒感染的假说[2]；1917年，法裔加拿大微生物学家 Félix d’Herelle在研究志贺痢疾杆菌时也发现了噬菌体的的存在，并正式将其命名为噬菌体[3]，并在进一步的实验后证实其可以有效的治疗细菌性感染[4]。至此，噬菌体研究开始了一个阶段的迅速发展。
20世纪国内的生物防治资源大部分局限在细菌、真菌、放线菌上，对噬菌体的研究相对空白。进入21世纪以来，随着细菌对抗生素耐药性的增强, 如今利用噬菌体进行细菌病害防治越来越受到人们的重视。与抗生素相比，噬菌体因其特异性强、副作用少、增殖能力强且不易产生抗性等优点在医学和食品上已较为广泛应用。