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虽然文生素C的测定方法越来越多,且也愈加完善,但大多数方法都存在着自己的局限与缺点。如滴定法的缺点是不能直接对样品中文生素C进行定量分析的,且易受其他物质的干扰,如果滴定材料中含有色素,将会对滴定终点的判断造成很大影响[32]。荧光光度分析法能够准确地对文生素C进行定量分析,但滴定范围十分有限,且花费较高,故当实验材料小,且其中的文生素C含量不多时才可以使用。紫外分光光度法干扰比较严重,材料需要经过前处理,且一种显色剂很难能够同时测定,因此在多组实验同时测定时并不适用[33-34]。梅特勒-托利多仪器法作为一种全自动、全
机械
化的文生素C测定方法,还未被大众人群所接受。本研究所利用的高效液相色谱法测定文生素C的含量,因其操作简单,测定范围广,测定速度快,定量分析灵敏度高,这种方法已经被越来越多的实验组织所采纳,并被广泛应用于多种食品、药物的文生素C定量分析之中[35-37]。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
1.1.1 实验仪器
LC-20A高效液相色谱仪(日本岛津有限公司),配紫外检测器;色谱柱Hedera ODS-2 C18(4.6 mm×250 mm,5 um)[38];离心机;
电子
天平;研钵;量筒;2000 mL和1000 mL容量瓶;布氏漏斗;烧杯。
1.1.2 实验试剂
草酸晶体(H2C2O4•2H2O);甲醇(CH3OH);文生素C的标准品;去离子水。
1.1.3 实验材料
南京农业大学茶学研究所中温室培养的安吉白茶扦插苗数棵,绝对低温控制在10 ℃以下,相对湿度控制在80%左右,模拟安吉白茶最适宜的生长环境[4]。扦插苗发育正常,无病虫害且叶片完好,分别取一、二、三片叶。
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