胰蛋白胨 美国BD公司
琼脂糖M 生工生物工程(上海)有限公司
50×TAE电泳缓冲液贮存液 生工生物工程(上海)有限公司
GenClean柱式琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒 生工生物工程(上海)有限公司
质粒DNA小量制备试剂盒(离心柱型) 生工生物工程(上海)有限公司
一步法制备高效感受态细胞试剂盒 生工生物工程(上海)有限公司
SD7002-LB Broth Medium-250G 生工生物工程(上海)有限公司
SD7003-LB Broth Agar-250G 生工生物工程(上海)有限公司
溴酚蓝 生工生物工程(上海)有限公司
石蜡油 生工生物工程(上海)有限公司
卡那霉素 生工生物工程(上海)有限公司
氨苄青霉素 生工生物工程(上海)有限公司
X-gal 生工生物工程(上海)有限公司
KCl固体 上海金山县化工厂
溴化乙锭(EB) 上海申能博彩生物科技有限公司
Na2PO4•7H2O 上海精化科技研究所
MgSO4 上海精化科技研究所
NaCl 上海精化科技研究所
KH2PO4 湖北化学试剂厂
CaCl2•6H2O 上海凌峰化学试剂有限公司
NH4Cl 上海凌峰化学试剂有限公司
2.12主要的仪器设备
实验所用的设备仪器见表2.2:
表2.2 仪器设备
仪器和设备 生产厂家
BayGene电泳槽 Beijing Bay Gene Biotech CompanyLimited
10μL、100μL、1000μL微量移液枪 Thermo Scientific
BCD-212型冰箱 博西华家用电器有限公司
K30型干式恒温器 杭州奥盛仪器有限公司
PL203型电子天平 梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司
XB70型制冰机 宁波格兰特制冷设备制造有限公司
QL-901型旋涡振荡器 其林贝尔仪器制造公司
TGL-16G型台式离心机 上海安亭科学仪器厂
BG-Power 600i型电泳仪 上海百晶生物技术有限公司
YXQ-LS-30 SII型立式压力蒸汽灭菌器 上海博迅实业有限公司医疗设备厂
GZX-9070MBE型数显鼓风干燥箱 上海博迅实业有限公司医疗设备厂
FR-180A型电泳槽 上海复日科技有限公司
紫外分光光度计 尤尼柯仪器有限公司
pHS-3C 型pH计 上海精密科学仪器有限公司
多功能酶标仪 BioTeK
NN-MX20WF型Panasonic微波炉 上海松下微波炉有限公司
THZ-98A型恒温振荡培养箱 上海一恒科技有限公司
HH.CP-TW(80L)型二氧化碳培养箱 上海一恒科技有限公司
BHC-1300ⅡA2型生物安全柜 苏州安泰空气技术有限公司
96孔板 浙江拱东医疗科技有限公司
2.13实验所用菌种
E.coliTOP10F菌种:不含质粒,实验室提供;
E.coli TOP10F'菌种:含有pPopCtrl1质粒菌种,具有卡那霉素抗性,实验室提供;
pEGFP-C1+质粒:上海捷瑞生物工程有限公司生物合成的目的序列插入到pEGFP-C1质粒中,导入DH5α菌中。
2.14培养基和试剂的制备
(1)LB液体培养基:称取25.0g GL7002-LB Broth-250G粉末,加蒸馏水至1000mL,121℃高压灭菌15min;
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