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摘要：番茄、烟草等茄科植物细菌型青枯病的防治是世界性的难题，传统的物理、化学方法都不能有效地控制该病害。“噬菌体疗法”、“生防菌疗法”是近年来对抗青枯菌的新方法。本研究从青枯病发病土壤中分离得到了青枯菌的噬菌体。但用同样的方法未能从全国192个地区的土壤样品中分离出生防菌解淀粉芽孢杆菌T-5的噬菌体。猜测是由于噬菌体专一性较强，只能从宿主菌所在环境中分离得到相应的噬菌体。因而从南农校园采集土壤，分离得到一株芽孢杆菌YKM-1，但未能从土壤中分离得到其噬菌体。猜测可能由于芽孢杆菌自身的性质，需要从特定的环境进行分离。37291
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毕业论文关键词：青枯菌；芽孢杆菌；噬菌体；生防菌；分离
Isolation and Identification of Specific Phages Infecting beneficial bacteria in rhizosphere
Abstract：Tomato, tobacco and other plant bacterial wilt control is a worldwide problem. Traditional physical and chemical methods cannot effectively control the disease. "Phage therapy" and "biocontrol therapy" are both new methods against pathogen Ralstonia solanacearum in recent years. The Phage Infecting Ralstonia solanacearum is isolated from diseased soil. But using the same method, none of the bacteriophage of Bacillus amyloliquefaciens T-5 is isolated from the soil samples of 192 different regions in China. Guess is due to its strong specificity, the corresponding phage can only be isolated from exactly where the host bacteria exists. Therefore, a strain of Bacillus sp. YKM-1 is isolated from NJAU campus, but its phage still cannot be isolated. It suggests that due to the nature of Bacillus sp. itself, its phage may needs to be separated from specific environment.
Key words: Ralstonia solanacearum；Bacillus sp.；phage；biocontrol bacteria；isolation
目 录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言（或绪论）1
1材料与方法2
1.1试验材料 2
1.1.1菌株和土样 2
1.1.2主要试剂2
1.2 试验方法4
1.2.1 青枯菌噬菌体的分离4
1.2.2 T-5噬菌体的分离 4
1.2.3 芽孢杆菌的分离与纯化 4
1.2.4 芽孢杆菌的鉴定 5
2结果与分析5
2.1 青枯菌噬菌体的分离 5
2.2 T-5噬菌体的分离 5
2.3 原位芽孢杆菌的分离 6
2.4芽孢杆菌的16S rRNA鉴定 6
2.5 原位芽孢杆菌噬菌体的分离 7
3讨论7
致谢8
参考文献8
根际有益菌专一噬菌体的筛选与鉴定
引言 1880年，美国北卡罗来纳州首次发现了烟草青枯病[1]。此后，由茄科雷尔氏菌 (青枯菌，Ralstonia solanacearum)引发的植物细菌型青枯病（bacterial wilt）已成为一种遍及全球的灾难性土传病害。全球范围内，其在亚热带、热带等气候温暖的地区有广泛的分布[2]，在我国，也严重影响了南方的多个省市地区[3]。 青枯菌菌系复杂，宿主范围广泛，据不完全估计，可侵染超过50个科数百种植物[4]，严重影响了我国番茄[5]、马铃薯[6]、玉米[7]、751椒[8]、生姜[9]、烟草[10]等农作物和经济作物的栽植。因此，防控青枯病是一项刻不容缓的任务。
每5年，国际上举办一次细菌青枯病学术研讨会，我国也于2016年在西南大学成功召开了第一届全国植物青枯病大会，对青枯病的各项研究进展进行了交流，也达成了一系列的合作。但到目前为止，生产上采取的各种青枯病防治措施仍然存在着各自的不足及局限性[11]。化学药剂的防治虽然简单方便快捷，但容易产生农药残留，进而污染环境。而且，长期施用化学药剂也会增强病原菌的耐药性，破坏土壤微生态系统[12-13]。采用轮作、早播早栽、高起垄、高培土等农业措施可以推迟发病高峰期，降低损失，但是治标不治本，并且会受多种自然、人为条件的限制[14-15]。选用抗性品种抵抗青枯病的措施经济有效，但青枯菌在不同环境下变异快，会产生各种不同的寄主专化型，所以不同的品种在不同的年份和地域的表现有差异。而且，随着种植时间的增加，同一品种的抗性会逐渐降低[15]。因此，进一步探究青枯菌的致病机理以及新的防治方法和措施，意义重大。