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摘要：本实验通过Real-Time PCR的方法，研究分析T1R3基因在徐淮山羊的胃肠道各个组织间的表达差异性，以此对反刍动物的代谢和动物产品生产在氨基酸需求方面提供理论依据。通过采集徐淮山羊胃肠道的组织，即瘤胃、网胃、瓣胃、皱胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠、直肠，提取出总RNA，测量并记录RNA的浓度与纯度。然后通过反转录得到cDNA，而后再以荧光定量聚合酶链反应（PCR）方法处理cDNA。在徐淮山羊胃肠道不同组织中，T1R3基因的表达显出较大的不同。研究数据为，各组织相对表达量依次是回肠（1.26）、十二指肠（1.00）、直肠（0.55）、空肠（0.38）、盲肠（0.025）、结肠（0.0035）、皱胃（0.002）、瓣胃（0.00196）、瘤胃（0.0008）、网胃（0.0005），胃肠道各段组织表达量较显著。本次实验在徐淮山羊各组织mRNA中均检测到T1R3基因的表达量，但结果显示表达量之间具有显著差异性。比如，T1R3基因表达量较高的是在回肠、十二指肠和直肠，而胃组织中表达量较低。37477
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毕业论文关键词：山羊；T1R3；实时定量PCR；差异分析
The study on Difference Expression of T1R3 Gene in Goat Gastrointestinal Tract
Abstract: In this paper, through the relative quantification PCR, we made research and analysis of expression of T1R3 gene in the xuhuai goat gastrointestinal tract. Provide a theoretical basis for solving the problem of amino acid metabolism and requirements. By means of gathering goat gastrointestinal tract, containing rumen, omasum, reticulum, abomasum, rectum, duodenum, cecum, jejunum, colon and ileum. After that, it is necessary to extract the Total RNA, keep an account and check sample potency and purity. Then, by means of the real-time quantitative PCR to deal with cDNA. In this study, the expression of the T1R3 mRNA in the gastrointestinal tract of goat show significant differences. The research report was as follows, ileum (1.26), duodena (1.00), rectum (0.55), Jejunum (0.38), cecuml (0.025), colonic (0.0035), abomasum (0.002), omasum (0.00196), rumens (0.0008), and reticulum (0.0005). In this research, we can found that the T1R3 gene express in each tissue of goat gastrointestinal tract. The tissues which the mRNA relative expression of T1R3 expressed the highest level was ileum, duodena and rectum, but the low quantity expressed in stomach tissue.
Key words: goat; T1R3; real-time PCR; variation analysis
目 录
前言 1
1 实验过程、材料和方法 2
1.1实验过程 2
1.2 实验材料 2
1.2.1实验样品来源 2
1.2.2实验仪器 2
1.2.3 实验试剂 3
1.3实验方法 3
1.3.1提取的各组织的总RNA 3
1.3.2提取的总RNA的质量检测 3
1.3.3样品RNA浓度和纯度的数据 3
1.3.4 反转录合成CDNA 4
1.3.5荧光实时定量PCR 5
2 结果与分析 5
2.1 PCR定量结果数据 5
2.2 目的基因和内参的扩增 6
2.3 PCR数据处理 8
2.4 T1R3基因差异性表达结果 8
3讨论 9
致谢 10
参考文献 11
前言
山羊出现在中国人民的生活和饮食上已经有几千年的历史，对于中国人民的生活产生了深刻的影响，人们通过饲养山羊获得经济及生活食用来源，一步步的推动了中华民族的前进。自从1978年以后，山羊的饲养在中国逐渐扩大，数量不断增多，分布越来越广，而且通过实践积累，人们对于山羊的饲养经验阅历都丰富起来，很好的带动了地方及全国的经济效益，提高了整个国家人民的生活水平状况。我们通过对山羊机体各组织的研究分析，希望从基因水平调控山羊的性能，从而为国家人们带来更加美好的生活。