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    2.1 材料红皮花生(Arachis hypogaea Linn)为供试植物,选取适合生长的花生种子若干粒。2.2 实验设计选取花生种子在 15%(V/V)浓度的 H2O2消毒 30min后,浸于去离子水中,于25~30℃ 环境下过夜培养,洗净后放在滤纸上,滤纸浸在去离子水中,让花生种子一半浸于水中,一半露在空气中,于28±2℃下催芽。出芽后放入洗干净的石英砂中培养7~9天,当幼苗长出真叶后,选取长势一致的植株,去掉子叶,转移至一次性杯子中进行培养液分梯度培养。在人工气候箱进行中进行花生幼苗的初期培养,控制光照时间为 12小时,光照强度控制在500~600 mol/m2•s,温度为28℃,湿度为 70%。培养液为基础培养液。 设置三个Ca浓度处理:0,0.1和 2.0mmol/L。分别代表无 Ca,低 Ca,正常 Ca培养水平,Ca以 Ca(NO4)2提供,不同的 Ca处理之间的 NO3-浓度差异用NaNO3补充。每个处理设计 4次重复。营养液pH为 6.2(用 NaOH或 HCl调节pH),每隔两到三天更换一次营养液[5]。培养 28~30天后,用所培养得到的花生幼苗,测定和分析钙离子对花生幼苗的生理影响。
    2.3 测定项目及方法
    2.3.1 生物量培养液培养 28d后,用去离子水洗净植株,擦拭干净,分别称量记录新鲜幼苗的根和除根以外茎叶的重量,算出根冠比;将根茎分别于105℃杀青 30min,65℃下烘干至恒重,称量,得到干物质重量。
    2.3.2 可溶性糖含量测定选用蒽酮法测定[8],称取 1g新鲜的花生叶子,于研钵中加少许乙醚,研磨至匀浆,倒入烧杯中,用 70℃热水洗涤研钵,洗液并入烧杯中,再加蒸馏水6~8ml,放入水浴锅中加热,70~80℃加入 30min左右,冷却后一滴一滴地加入饱和中性醋酸铅,直至加入醋酸铅时不再产生沉淀,将此混合物连同残渣一并倒入20ml容量瓶中,定溶。以干燥漏斗滤于三角烧杯中,瓶中事先放入草酸钠粉末,生成草酸铅沉淀,再过滤,得到可溶性糖提取液。取上述可溶性糖提取液1ml放入试管中,加蒽酮试 5ml,沸水浴中煮沸 10min,冷却,于分光光度计(UV-7504单光束紫外-可见分光光度计)上,以波长 625nm测得吸光度。在标准曲线上查取提取液中糖的含量,然后再计算样品中含糖百分数。在分光光度计中,625nm下测量,得到各浓度下样的分光光度值,在标准曲线中找到对应的糖浓度,根据公式算出糖含量。
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