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蚕丝是人类利用最早的蛋白质之一，主要应用于纺织品中。中国的蚕丝主要为南方的桑蚕丝和北方的柞蚕丝，而柞蚕丝因为种种原因被市场忽视，本课题所研究的对象正是被忽视的柞蚕丝。现在市场所面临的技术难题便是如何找到保留柞蚕丝蛋白的大部分蛋白结构，而将柞蚕丝蛋白水解为小分子可溶性蛋白的生物方法。 本课题所研究的项目是从周围的环境中选育出产柞蚕丝蛋白水解酶的菌株，对该菌落进行生长特性，产酶效率等进行鉴定，并保存该菌株。从该菌株中提取出所需要的柞蚕丝蛋白酶，对其水解柞蚕丝蛋白的效率、蛋白酶活性等进行细致的研究。 41302
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毕业论文关键词 柞蚕丝 丝蛋白酶 菌株选育 酶学鉴定
Title Screening of Protease Producing Strains
Abstract Silk protein is one of the earliest human use, mainly used in textiles.Chinese silk is mainly for south of mulberry silk and north of tussah silk,but for a variety of reasons the tussah silk ignored by the market.This study is the neglect of tussah silk.Technical problems facing the market now are biological methods of how to find the retention of tussah silk fibroin and most of the protein structure, and tussah silk protein was hydrolyzed to soluble protein small molecule. This study is researched for screning of protease from the surrounding environment. Its characteristics will be identified such as growth characteristics and enzyme production efficiency.And we will preservation the strain. We will conduct a detailed study of the protease such as it’s efficiency of hydrolysis of tussah silk protein and protease activity.
Keywords Tussah silk Silk protease Strain breeding Enzyme identification
目次
1引言.1
1.1柞蚕丝的发展及现状1
1.2蚕丝组成及结构....1
1.3酶.2
1.4细菌....4
2实验仪器与实验方法..7
2.1实验所用器材.7
2.2实验试剂7
2.3实验方法8
3实验结果.12
3.1菌株筛选....12
3.2水解丝蛋白鉴定...12
3.3丝蛋白酶粗提13
3.4丝蛋白酶活性鉴定.14
3.5产丝蛋白酶菌株特性....16
3.6革兰氏染色镜检...17
3.8前景展望....19
结论.20
致谢.21
参考文献.22
1 引言 1.1 柞蚕丝的发展及现状 蚕丝是天然蛋白质纤文的一种，是人类最早利用的天然蛋白之一。中国早在 5300多年前就已经利用蚕丝做成丝线等简单的丝制用品。公元前 2世纪，东西方的大规模经济交流主要商品便是由蚕丝织成的丝绸，期间经济交流的主要路线史称“丝绸之路”。到现在，中国的丝绸仍然远销世界各地，成为中国文化的代表之一。 中国的人工饲养的蚕主要有桑蚕、柞蚕、蓖麻蚕、木薯蚕、马桑蚕等等，桑蚕丝织成的丝织品质量最好，价格也最昂贵。 本课题所研究的柞蚕在中国北方有大量养殖。柞蚕在分类学上属于节肢动物门，昆虫纲鳞翅目，天蚕蛾科柞蚕属 ，学名为AnfheraeapernyiGuerin Meneville[1]。其中辽宁省丹东市曾将柞蚕养殖作为主要产业，其自然的柞林条件及气候环境使得柞蚕业迅猛发展，柞蚕放养面积及茧产量达到了全世界 25%左右[2]。由于柞蚕丝的柔韧性、舒适性、色泽等较差，当今高质量、价格低的人工合成丝织品又盛行，曾经的丹东的柞蚕丝老牌工厂纷纷停产，现存的柞蚕养殖厂也是屈指可数。不过令人欣慰的是，柞蚕蚕丝蛋白在细胞附着、抗辐射等方面有着突出表现，使柞蚕蚕丝又有了很大的市场发展空间。 现在由蚕丝水解的得到的丝蛋白已经应用在精细化工、生物医学、食品等诸多行业，但柞蚕丝的现代工业仍发展缓慢，当务之急便是寻找到高效率、环保、廉价、快捷的柞蚕丝蛋白酶，将大分子的不溶的柞蚕丝蛋白水解成小分子可溶性蛋白的蛋白酶，使得柞蚕丝蛋白得以进一步的加工利用。