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    1.5实验方法

    1.5.1确定以整豆为培养基培养纳豆的最佳时间

    1)活化菌株:在超净台上挑取划线平板上的纳豆杆菌,源)自(751+文=论]文]网[www.751com.cn,接种于液体LB培养基中,包扎好瓶口,置于37℃下摇瓶培养24h。

    2)浸泡大豆:称取大豆200g,浸泡12h,每过2h换一次水。

    3)分装大豆:将浸泡好的大豆沥去水,分装于16个250mL的三角瓶中,每瓶装约30g(使大豆正好铺满瓶底),包扎,121℃下灭菌20min。

    4)接种菌株:在超净台进行操作,将已活化的菌株接种到冷却后的大豆培养基中,每瓶接种菌液1.5mL,将培养基封口放置在37℃培养箱中培养。

    5)纳豆处理与保存:每隔一天(24h),取出4瓶各加20mL去离子水,倒出菌液,标上日期,低温保存备用,共取4d。

    6)配置纤维活性平板[15]:取人纤维蛋白30mg于3.5cm的平板中,加生理盐水2mL,使蛋白完全溶解,加入凝血酶30μL,凝固后使用。

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