1.1.2 仪器
CW-2000型超声-微波协同萃取仪,上海新拓微波溶样测试技术有限公司;FA-2004B型电子天平,上海精科天美科学仪器有限公司;UV757系列紫外可见分光光度计,上海精科公司;六两装高速万能粉碎机,浙江屹立工贸有限公司;DHG-9430B型电热恒温鼓风干燥箱,上海三发科学仪器有限公司; TDL-5-A型离心机,上海安亭科学仪器厂;
2 方法
2.1 标准溶液的配制
精密称取在120℃下干燥至恒定质量的芦丁标准品20.00mg,置100ml三角烧瓶中,加甲醇40ml,超声-微波处理溶解,定容至100ml,得到0.2mol/L的芦丁母液,备用。
2.2 显色试剂的配制
精密称取ALCL31.34g,加甲醇定容至100ml,配置成0.1mol/L的显色试剂,备用。
2.3 最大吸收峰的确定
精密移取芦丁母液1ml,置于10ml容量瓶,加入2ml 0.1mol/L的ALCL3溶液,50%乙醇定容至刻度,充分显色25min,在200nm-600nm范围内扫描,记录吸光度值,根据紫外光谱图,确定其最大吸收波长为420nm。
2.4 标准曲线的建立
从芦丁标准品溶液中,精密移取0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0ml,分别至6个10ml的容量瓶中,再分别加入0.1mol/L的ALCL3溶液2ml,然后加50%乙醇定容至刻度,摇匀,最后静置显色25min。在最大吸收波长420nm处测定吸光度,以浓度(C)为横坐标,吸光度(A)为纵坐标绘制标准曲线,得回归线性方程为:Y=3.703X-0.027,R2=0.984。