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摘 要：在许多植物中，转化效率低一直是制约分子育种和基因功能研究的障碍。目前，在拟南芥等模式植物的研究中，非组培方法已成为遗传转化的主要手段，这些方法在其它植物中也有广阔的应用前景。本论文介绍了几种较为成功的非组培遗传转化方法的应用情况和技术原理，并对下一步研究工作提出了建议。关键词：植物；非组培转化；靶组织；农杆菌8257
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Non-Tissue Culture Transformation in Plants
Abstract: In many plants，the efficiency of molecular breeding and gene functional analysis are limited because of low transformation rate．At present，non-tissue culture transformation has become the major method of transformation in model plants like Arabidopsis. The application of non-tissue culture transformation in other plants is also promising. In this review，the techniques and possible mechanism of several successful non-tissue culture transformation methods are introduced and some advices on the future studies are put forward．
Key words: Plant; Non-tissue culture transformation; Target tissue; Agrobacterium
目 录
摘 要 1
引 言 1
1 非组培遗传转化的优势 2
2 应用中的非组培转化技术 2
2.1 农杆菌真空渗透法 2
2.2 农杆菌花蕾渗透法 3
2.3 花粉管通道法 4
2.4 胚性组织浸染法 5
3 其它非组培转化方法 6
3.1 种子农杆菌渗透法 6
3.2 子房注射法 6
3.3 农杆菌花粉介导法 6
3.4 腋芽或子叶节侵染法 6
3.5 电击法 6
4 非组培遗传转化机理 7
5 讨论与展望 9
5.1 研究中存在问题 9
5.2 未来研究的方向 9
参考文献 10
致 谢 14
植物非组培遗传转化的研究引言
植物遗传转化始于20世纪70年代(Hooy-kaas and Schilperoort, 1992)，30年来，植物基因工程取得长足发展，转基因作物在生产上大面积推广应用。但是，在大多数植物中还存在转化率低和转基因植株再生、鉴定难，操作周期长等问题(Birch, 1997)，在基因组研究中获得大量转基因植株仍较困难(Bent，2000)。目前，植物遗传转化最常用的两种方法是农杆菌介导法和基因枪法，转化的受体组织可以是愈伤组织、原生质体等分离细胞，也可以是完整的植物细胞。许多研究者曾寻找避免组织培养或植株再生的植物基因转化手段，并在实践中摸索出了一些行之有效的方法，这些方法的受体多是分生组织或生殖器官(Birch, 1997)。有的方法也包括一些较为简单的组培，如一些实验室在进行小麦、水稻和谷子等作物的转化时，所用的受体组织是幼嫩的顶端分生组织，其方法是将分生组织去掉或部分划伤，涂抹菌液或DNA， 转化后的组织利用抗生素筛选，再生植株，收获种子；有的方法则不需要任何组培， 而直接将农杆菌菌液或钨粉包裹的DNA溶液涂于顶端分生组织或花器官，待植株成熟收获种子后，通过抗生素筛选和分子检测获得转化植株。
植物遗传转化是改良性状，提高作物产量和品质的高效生物技术，对保障未来世界粮食安全具有重要的战略意义。它将不会受制于目前人们的任何偏见而成为未来作物育种的主导方向。植物基因功能的验证也需要进行遗传转化，因此遗传转化技术及其技术优化的研究具有重要的理论意义和实际应用价值。本研究根据最新文献，对国内外植物非组培遗传转化的研究进行总结和评述，以期为该领域研究者提供有价值信息。