(ⅱ) 酒石酸亚铁分光光度法
1953年,Rous等简历植物多酚的酒石酸亚铁545nm分光光光度测定法,其原理是在一定的条件下,食品或植物组织中的多酚类物质能与酒石酸亚铁形成蓝紫色络合物,络合物的吸光度值在一定的浓度范围中与多酚类物质的浓度成正比。此后回瑞华等,采用三波长-光谱法消除随浓度不同发生的本底飘移及吸收峰不对称给定量分析照成的影响,建立了酚类物质酒石酸亚铁分光光度测定法。酒石酸亚铁分光光度法是多酚类化合物测定中引用最多的快速分析方法,也是我国测定茶多酚的国家标准方法。
(ⅲ) 其他显色方法
除了以上几种显色反应外,还有KFe[Fe(CN)6]法,此方法适用于食品中微量多酚类化合物的测定。原理是利用多酚类物质在碱性条件下能与铁氨离子生成深红色络合物。钼酸铵分光光度法,依据的是多酚类物质在酸性条件下与钼酸铵生成黄色钼酸脂的显色反应。另外还有多酚在酸性条件下与磷钼酸铵结合形成磷钼酸脂的反应等。这些方法各有利弊,在此不再累诉。
(2) 原子吸收分光光度法
原子吸收分光光度法测定多酚的含量与可见分光光度法的不同之处在于后者测定的是络合体系中络合物含量,而前者 是多酚和金属离子的反应,然后通过测定络合体系上清液金属离子或剩余的金属离子量而间接测定之。
原子吸收风光光度法选择性比高锰酸钾滴定法要高,但增加了沉淀离心分离步骤,操作比较繁琐。与Folin-Ciocalteu试剂法相比,本方法更适合于测定食品中的高分子量的多酚类化合物,且干扰要比后者要小。
(3) 红外光谱法
近红外光谱的波长范围为780~2526nm,其信息主要是分子结构中的C-H.O-H,C-O等基因的倍频吸收及其伸缩振动、弯曲振动的合频和差频的吸收峰。在特定波长处,不同样品的吸收值差异放映样品中酚组分含量的不同,可定量快速检测总儿茶素在茶多酚中的含量。
(4) 流动注射法
流动注射分析法以其高精度、高效率及装置简单等优点被广泛应用。此方法测定的是还原性多酚的含量,因此对样品的测定结果较标准法偏低。余宇燕等建立了流动注射化学发光法测定茶多酚的新方法。
1.5 研究意义
多酚研究受到重视的原因可能主要有几方面的因素。
1.5.1 植物多酚是清洁化生产的重要原料
作为一类源于绿色植物的生物质材料,多酚与纤文素、木质素相比具有结构多样、反应活性高的特点;而与石油材料相比,在自然界的储存相对丰富且可以永续不断,对环境的影响很小。在相当多的应用领域中,多酚具有合成材料难以仿制的性能和天然感。因此,在倡导绿色化学的今天,通过合理、科学的开发利用,多酚已在工业生产中日益受到重视。
1.5.2 植物多酚是一类重要的生物活性物质
随着植物多酚化学和药理学的发展,人们逐渐认识到,多酚同生物碱、皂和黄酮类一样也是一类具有独特生理活性和药理活性的天然产物。当前“追求自然”消费观念的兴起,使单宁在制药、生化、日化、食品以及精细化工等高科技领域具有广阔的应用前景。此外,单宁与人们日常生活密切相关,因此从营养学和植保的角度研究单宁的作用也具有重要的意义。
1.5.3 植物多酚化学的发展使其广泛应用成为可能
虽然人类对多酚的认识已经有几千年的历史,但是知道本世纪80年代后,基于植物多酚化学结构的明确,人们才从分子水平上对多酚的性质有了深刻的理解,认识到多酚的性质和应用都根植于其独特的化学结构;从另一角度看,对多酚化学的基础研究对更多领域都具有借鉴和指导意义。如对单宁与蛋白质结合的研究结果,不仅可应用于制革、中草药,而且对食品、畜牧和植保等诸多领域皆具有参考价值。
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